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非同位素分析基因活性实验——冻融裂解细胞荧光素酶分析

2019.3.26
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验材料

哺乳动物细胞

试剂、试剂盒

PBS

仪器、耗材

培养皿细胞刮子离心机

实验步骤

1.  用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。
 

2.  每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液，立即用橡胶刮子刮下细抱，移至1.5 ml 微量离心管中。离心15~30 s，弃上清。

3.  在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液，经3次冻融裂解细胞膜。

 

4.  将裂解的细胞在4℃以最大速度离心5 min，移出上清，分析其荧光素酶的活性。


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