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基于 PCR 的克隆方案利用了可变区中框架区和先导区的保守序列,尽管用框架区中的保守序列可合成引物,用于克隆可变区,但会引起框架区中氨基酸的改变,从而影响抗原结合。因此,用保守的疏水先导序列合成引物是比较好的方案。
基本方案 1 通 过 使 用 冗 余 引 物 克 隆 和 表 达 免 疫 球 蛋 白 可 变 区注意:高压灭菌所有接触 RNA 的器械和容器,并用 DEPC 处理过的水冲洗。实验过程中一直戴手套。所有用于 RNA 的水和盐溶液都用 DEPC 处 理(附 录 1)