分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

凝集反应实验_玻片凝集法

2019.4.06
头像

zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

细菌细胞或红细胞等颗粒性抗原与特异性抗体结合后,在有电解质的情况下,会出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应,也叫直接凝集反应。凝集反应可说是经典的血淸学反应,使用历史长,并一直沿用至今,但技术方法有很大的发展与改进,例如,除直接凝集反应外,又有将可溶性抗原吸附到颗粒性载体(如红细胞、白陶土、离子交换树脂和火棉胶颗粒等)表面,然后再与相应抗体结合的间接凝集反应。用红细胞作为载体的间接凝集反应叫间接血凝试验,还有血凝抑制试验、反向间接血凝试验等。

实验方法原理

玻片凝集法可利用已知抗血淸鉴定未知细菌,优点是极端快速,为诊断肠道传染病时鉴定病入标本中肠道细菌的重要手段。


血清学反应的基本组成成分除抗原与相对应的抗体外,尚需加入电解质(一般用生理盐水)。电解质的作用主要是消除抗原抗体结合物表面上的电荷,使其失去同电相斥的作用而转变为互相吸引,否则即使抗原与抗体发生结合亦不能聚合成明显的肉眼可见的反应物。


在一系列稀释的血清中(例如 1:5、1:10、1:20、1:40……),能与抗原发生明显凝集反应的最高稀释度的倒数,即为该免疫血清的效价。假如从 1:5 至 1:20 三个稀释度有凝集反应,1:40 的无凝集反应,則血清效价为 20。


实验材料

大肠杆菌琼脂斜面培养物

试剂、试剂盒

大肠杆菌免疫血清生理盐水

仪器、耗材

玻片接种环

实验步骤

1. 在玻片的一端用滴瓶中的小滴管加一滴 1:10 大肠杆菌免疫血清,另一端加一滴生理盐水。


2. 用接种环自大肠杆菌琼脂斜面上挑取少许细菌混入生理盐水内,并搅匀;同法挑取少许细菌混入血清内,搅匀。


3. 将玻片略为摆动后静置室温中,1~3 分钟后即可观察到一端有凝集反应出现(图 1),另一端为生理盐水对照,仍为均匀混浊。


图 1 玻片凝集试验
A. 稀释抗血清+大肠杆菌(阳性反应);
B. 生理盐水+ 大肠杆菌(阴性反应)。

展开


互联网
仪器推荐
文章推荐