细菌鉴定实验——玻片凝集反应

伤寒杆菌大肠杆菌培养物伤寒杆菌诊断血清生理盐水

洁净载玻片接种环酒精灯特种铅笔试管试管架吸管

1.  取载玻片一张平置实验台上，用特种铅笔或记号笔划分为三格，并标明1，2，3。

2.  用1 ml 吸管吸取生理盐水1~2 滴于玻片第1 格内，另取一支吸管，吸取1：10 稀释的伤寒杆菌诊断血清1~2 滴于第2，3 格内。

3.  将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌，冷却后取少许伤寒杆菌培养物与第1格内的生理盐水混合，并涂抹成均匀悬液。然后用同法取少许伤寒杆菌培养物与第2 格内的诊断血清混合，并涂抹均匀。烧灼接种环，待冷却后取少许大肠杆菌培养物与第3 格内的诊断血清混合并涂抹成均匀悬液。静置数分钟后观察结果。

[结果观察]
如上述混合悬液由均匀混浊状变为澄清透明，并出现大小不等的乳白色凝集块者即为阳性；如混合物仍呈均匀混浊状则为阴性。如肉眼观察不够清楚，可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。

本次实验结果第2 格内应出现大小不等的乳白色凝集物（阳性），第1 ，3 格内无凝集物（阴性）

1.  伤寒杆菌为肠道致病菌，在实验中务必严格无菌操作，遵守实验规则，用后的载玻片应立即放入盛有消毒剂的容器内，接种环必须作烧灼灭菌处理。

2.  取细菌培养物时，不宜过多，与诊断血清混合涂抹时，必须将细菌涂散，涂均匀，但不宜涂得太宽，以免很快干涸而影响结果观察。