结缔组织染色实验——弹力纤维与胶原纤维染色

石蜡组织切片

维多利亚蓝糊精间苯二酚蒸馏水乙醇三氯化铁水溶液浓盐酸苯酚二甲苯中性树胶

60 ℃恒温箱滤纸

维多利亚蓝染色液：维多利亚蓝（Victoria blue）2 g，糊精 0.5 g，间苯二酚 4 g，蒸馏水 200 ml。将上述物质混合后加热煮沸，边煮边搅拌，约 5min。然后用另一容器取 30％ 三氯化铁水溶液 25 ml，另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中，继续煮沸 3 min，不断搅拌溶液呈胶冻状。去火，冷却过滤，将滤纸上的残渣连同滤纸一起放在 60℃ 恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末，再将其溶于 400 ml 的 70％ 乙醇液中。然后加浓盐酸 4 ml 和苯酚 5 g，放置至成熟后使用。

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。

2. 切片入 70％ 乙醇中洗 2 min。

3. 将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染 2～5 h。

4. 直接入 95％ 乙醇中分色数秒钟。

5. 用蒸馏水洗 2 min。

6. 用丽春红-苦味酸染色液滴染切片 3 min。

7. 直接用无水乙醇冲洗多余染色液 2 次。

8. 二甲苯透明和中性树胶封固。

1. 维多利亚蓝染色液可在室温中存放较长时间，染色液浸染后倒回原处，可反复使用。

2. 95％ 乙醇分色后，立即浸入水中，可用显微镜观察染色程度，如果较浅或较深，可再重复染色或分色。

结果：弹力纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色，背景呈黄色。