实验方法原理 | 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 制混合液 加一滴 6% 葡萄糖液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一环墨水,充分混匀。 2. 涂片 另取一端边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉,当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端,使混合液铺成薄层(图 IV-4)。 3. 干燥 空气中自然干燥。 4. 固定 用甲醇浸没涂片固定一分钟,倾去甲醇。 5. 干燥 在酒精灯上方用文火干燥。 6. 染色 用甲基紫染 1~2 min。 7. 水洗 用自来水轻轻冲洗,自然干燥。 8. 镜检 用低倍和高倍镜观察。 背景灰色,菌体紫色,菌体周围的清晰透明圈为荚膜。 展开 |
注意事项 | 玻片必须洁净无油渍,否则,涂片时混合液不能均匀散开。 |