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测定pH对微生物的影响实验2

2019.4.08
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理pH 对微生物生命活动的影响是通过以下几方面实现的:一是使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生变化,从而影响其生物活性;二是引起细胞膜电荷变化,导致微生物细胞吸收营养物质能力改变;其三是改变环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性。不同微生物对 pH 条件的要求各不相同。它们只能在一定的 pH 范围内生长,这个 pH 范围有宽、有窄,而其生长最适 pH 常限于一个较窄的 pH 范围,对 pH 条件的不同要求在一定程度上反映出微生物对环境的适应能力。
实验材料

粪产碱杆菌大肠杆菌酿酒酵母

试剂、试剂盒

无菌生理盐水

仪器、耗材

牛肉膏蛋白胨液体培养基无菌吸管大试管1 cm 比色杯722 型分光光度计

实验步骤


1. 无菌操作吸取适量无菌生理盐水加入到粪产碱杆菌、大肠杆菌及酿酒酵母斜面试管中,制成菌悬液。使其 OD600 nm 值均为 0.05。


2. 无菌操作分别吸取 0.1 ml 上述三种菌悬液,分别接种于装有 5 ml 不同 pH 的牛肉膏蛋白胨液体培养基的大试管中。


3. 将接种大肠杆菌和粪产碱杆菌的 8 支试管置于 37℃ 温室保温 24~48 h。将接种有酿酒酵母的试管置于 28℃ 温室保温 48~72 h。


4 将上述试管取出,利用 722 型分光光度计测定培养物的 OD600 nm 值。

注意事项

吸取菌液时要将菌液吹打均匀,保证各管中接入的菌液浓度一致。

其他

牛肉膏蛋白胨液体培养基,用 1 mol/ L NaOH 和 1 mol/ L HCl 将其 pH 分别调至 3,5,7,9。


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