药物的镇痛作用实验

小鼠（昆明种）雌雄各半

盐酸吗啡溶液4%盐酸水杨酸钠（乙酰水杨酸）溶液苦味酸生理盐水

电热板注射器天平

1. 筛选小鼠　将小鼠置于温度55℃±0.5℃的金属热板上，测定其疼痛反应（舔后足现象）的出现时间，共测定2次，每次间隔5min。若出现疼痛反应的时间在10s至30s之间，则视为合格。共筛选出9只小鼠。

2. 分组　先将小鼠逐一称重，再按照体重由小到大（或由大到小）排序。按照简化随机原则分为3组（甲、乙、丙），每组3只。

3. 小鼠腹腔注射给药（15ml/kg）　甲组为0.1%盐酸吗啡溶液，乙组为4%盐酸水杨酸钠（乙酰水杨酸）溶液，丙组为生理盐水。记录给药时间。

4. 观察　给药15，30，45，60min后分别使用热板法测定疼痛反应出现时间（痛阈），若置于热板上60s内仍未出现疼痛反应，则均视为60s。

5. 计算痛阈提高百分率

1. 小鼠性别选择：由于雄性小鼠阴囊下垂，阴囊皮肤可接触热板，并对疼痛较为敏感，可能影响实验结果，故本实验中选择雌性小鼠。

2. 若小鼠在热板上60s内仍未出现疼痛反应，亦要将其从热板上移开，以免烫伤。

3. 热板法为评价药物镇痛作用的常用方法，其优点在于装置简便、对小鼠损伤小、且实验动物可反复利用。除热刺激致痛模型外，镇痛药的其他筛选模型亦包括：机械刺激、电刺激、化学刺激等方法。热刺激、机械刺激及电刺激致痛模型均适用于筛选麻醉性镇痛药，而化学刺激致痛模型（扭体法）适用于筛选解热镇痛药。

镇痛机制：痛觉向中枢传导过程中，痛觉刺激感觉神经末梢并释放Glu和SP，作用于相应受体而完成痛觉冲动向中枢的传递引起疼痛。内源性阿片肽由特定的神经元释放后可激动感觉神经突触前、后膜上的阿片受体，通过G-蛋白偶联机制，抑制腺苷酸环化酶、促进K+外流、减少Ca2+内流，使突触前膜递质释放减少、突触后膜超极化，最终减弱或阻滞痛觉信号的传递，产生镇痛作用。

吗啡类药物通过激动脊髓胶质区、丘脑内侧、脑室及导水管周围灰质μ受体，模拟内源性阿片肽而发挥镇痛作用，作用于边缘系统和蓝斑的阿片受体，则可减缓疼痛所引起的不愉快、焦虑等情绪和致欣快。