冷冻切片机可以用于:(2)切制薄而均匀的组织片;(2)组织用坚硬的石蜡或其他物质支持,每切一次借切片厚度器自动向前(向刀的方向)推进所需距离,厚度器的梯度通常为1微米。
实验方法原理 | 切制石蜡包埋的组织时,由于与前一张切片的蜡边粘着,而制成多张切片的切片条。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 安装刀具,移上安全杆。调整切片机温度到-20 ℃((右手边up 和down 二个按钮调节, up调高温度, down,降低温度)。 2. 从-80 ℃冰箱取出脑组织在切片机或-20 ℃冰箱中放1小时左右,目的为了平衡组织温度,太冷会在切片时出现脑片破裂的情况。 3. 用包埋剂(胶水代替)把组织固定在载物盘上(Blocker),注意一定要把脑放正。 4. 后退样品固定器(specimen holder),固定载物盘,并适当调节摇杆, 使的上下左右都正。
7. 到适当时候,贴几张脑片以确定上下左右是否正,并对照图谱找出大概位置。注意:贴片时手放在载玻片的两头,一端靠在切片机刀尾的位置轻轻往下压。 8. 对照图谱找到所要找到的核团并各留具有SON,PVN,海马(CA1,CA2,CA3)的典型脑片,并作上标记。 **PVN的确定:
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注意事项 | 切片时,切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一载玻片,将其附贴上即可。 |
其他 | 在切片过程中,视束有什么变化?并画出出现SON,PVN 和海马时视束的形状。 |