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1.固定。大鼠或小鼠灌注取脑,取脑后用多聚甲醛浸泡固定,即能达到冲洗的目的,又不损害组织。2.脱水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 进行脑组织梯度脱水,脑组织沉下去就是脱水好了。3.冰冻切片,推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织,用OCT胶包埋,一层层的包埋,注意:不能有气泡,否则营销切片;不能留有空隙否则会冻坏脑组织。冰冻切片的温度是-18℃~-25℃之间都可以的,脑组织最好是-18℃。