1．血液标本的采集。
（1）采血的时间
应尽可能地在应用抗菌素之前采血。最佳时间是当预料患者将要出现寒战或有一温度高峰时。建议取两个或三个血样培养，分别间隔1小时(假如治疗不能拖延，间隔时间可以短些)。三次以上的血培养很少需要。
重复培养的优点如下：
a.减少漏诊一过性菌血症的机;
b.假如多次静脉穿刺术后发现腐物寄生菌（如表皮葡萄球菌），则可确定它们致病的作用。
（2）采血量
因为通常每毫升血所含的细菌数量小，所以采集合适的血量很重要，对成年人，每次抽血10ml；儿童2～5ml；婴幼儿和新生儿，常最多才能采到1-2ml。
（3）皮肤消毒
静脉穿刺部位应用杀菌消毒液仔细备皮：用碘酊、10％的聚烯吡酮碘，75％的酒精，或者70％的酒精中加用0．5％洗必太，在抽血前允许皮肤上的消毒剂挥发干，用过碘酊后，为避免可能的皮肤刺激，应用75％的酒精脱碘。
仔细备皮后，存在于深层皮肤的某些细菌仍会得到进入血液的机会，如表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌，甚至梭状芽胞杆菌的孢子。假菌血症(假阳性的血培养)可因应用污染的抗菌溶液、注射器或针头引起，如果在一家医院中，反复分离到一种不常见细菌(如葱头假单胞菌或沙雷氏菌)，则应高度怀疑院内感染，应加强调查。假如使用已采血供化学分析或测红细胞沉降速度的注射器，那么另一个污染的途径是针与非无菌的小瓶(或溶液)接触。
（4）抗凝剂
用聚乙烯磺酸钠(SPS)作为抗凝剂，因为它能抑制血清和吞噬细胞的抗细菌反应。如果血标本立即加入足量(50 ml)的液体培养基并充分混合而无凝块，则不需加抗凝剂。
2．脑脊液标本的采集
由临床医生进行腰椎或脑室穿刺，将约5～lOml的CSF分别收入两个无菌试管。考虑到有医源性感染的危险，对皮肤彻底消毒是必要的。部分CSF标本被用于细胞学和化学性检查，剩余的用于微生物学检查。应将标本立即送往实验室，运送过程应快，因为细胞很快就会衰变，任何延误都会产生一个不能反映实际临床情况的细胞计数。
3．尿液标本的采集
采集清洁中段尿液，特别是对妇女、儿童，因为尿液本身就是一个很好的培养基，所以采集标本2小时内便应在验室内进行检验，或送到实验室前将标本冷藏于4℃的条件下，并不能超过18小时。需培养的尿标本应尽可能在早晨采集，可以要求病人头一天晚上不要排尿，坚持到采集尿液标本时。
女性患者：
能走动的女性患者应：
（1）用肥皂和清水彻底洗手，并用清洁的毛巾擦干。
（2）在合适的房间脱衣，分开阴唇，用无菌的纱布垫和温肥皂水从前向后彻底擦洗外阴和阴唇。
（3）用温水彻底冲洗并用一块无菌纱布垫擦干，在整个过程中，患者应将两侧的阴唇分开，手指不要接触已清洗过的部位。
（4）排尿，去掉第一段尿，将剩余的尿液接入无菌容器内。采好尿液后立即盖好容器盖子。
（5）把盛在密闭容器内的清洁中段尿交给护理人员，以便立即送往实验室。
对于卧床不起的病人，也进行同样的过程，不同的是，在要求病人排尿前要由一名护士协助。必要的话，应由护士亲自完成整个清洗过程。
在这两种情况下，都应进行各种努力把清洁的尿液收入无菌容器中，保证将有关标本和病人的有关信息、临床诊断和试验要求一起立即送往实验室。
男性患者
能走动的男性患者应注意以下几项：
（1）首先把手洗干净。
（2）包皮上翻(假如没有做过包皮环切术)，排出一小部分尿液。
（3）在包皮上翻状态下，把剩余的大部分尿液排入一个无菌容器，这就是中段尿标本。
（4）盖好容器盖，交给护理人员，以便立即送往实验室。
对于卧床不起的病人应注意：
（1）必要时，由护理人员将患者的包皮上翻，用肥皂水清洗阴茎头，并纱布擦干。
（2）在包皮上翻状态下，让患者把一小部分尿排到一个尿壶里。
（3）然后让患者把大部分的剩余尿排到无菌容器内，盖上容器盖，把标本送到实验室。
婴儿和儿童
收集在床上或不能配合的婴儿和儿童的清洁尿液比较困难。让患儿饮水或其它饮料，清洁外生殖器。让患儿坐在妈妈、护士或病房服务员的腿上，然后鼓励患儿排尿，并尽可能地把尿接入无菌容器，盖上盖子，并立即送到实验室检验。
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