胼胝体染色

实验概要

本实验介绍了植物叶片胼胝体染色的基本方法。

主要试剂

50uM雌激素，40uMf1g22，脱色液(水:甘油:乳酸:水饱和酚:酒精==1:1:1:1:8)，50%酒精，染色液(150 mM K₂HPO₄，pH9.5，0.01% aniline blue)

主要设备

荧光显微镜，Image J软件，注射器，载玻片

实验材料

植物叶片

实验步骤

1. 挑选5-6周大的植物叶片在50uM的雌激素或者水诱导12小时后注射40uMf1g22或者水。

2. 12小时后取下叶片，浸泡于脱色液(水:甘油:乳酸:水饱和酚:酒精==1:1:1:1:8)中。

3. 抽真空15分钟。

4. 65℃放置30-45分钟直到叶片透明。

5. 分别用50%酒精和水漂洗一次。

6. 置于染色液(150 mM K₂HPO₄，pH9.5，0.01% aniline blue)中染色45分钟。

7. 取出叶片置于载玻片上，在荧光显微镜下的紫外激发光下照相。

8. 用Image J软件(http: //www. uhnresearch. ca/wcif)对0.1 mm²叶片而积内的胼胝体计数。