新鲜冰冻血浆中凝血因子检测结果与分析

【关键词】  新鲜冰冻血浆; 凝血因子; 活性
　根据卫生部临床输血技术规范要求，新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)自血液采集后6～8 h之内经分离放入-50℃速冻成块，在-30℃保存1年内几乎含有全部凝血因子，包括不稳定因子Ⅴ和Ⅷ[12]。而血液凝血因子易受血浆制备、储存、运输等条件的影响而失活，从而导致血液疗效的降低。但由于FFP仍是目前临床预防和治疗出、凝血功能障碍的血制品之一，所以了解和掌握FFP中血液凝血因子的含量及活性显得极为重要。我们针对市中心血站提供我院的FFP随机抽查10份，进行部分凝血因子的检查，现将结果报告如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料来源 本次抽查10份FFP均来自蚌埠市中心血站，ACDA抗凝全血分离制备而成。实验仪器：TECO COATRON1800全自动血凝分析仪。试剂均有DADE BEHRING公司生产。标准血清(Lot.No.102518):PT试剂(Lot.No.102627)：APTT(Lot.No.103128)：Fib试剂(Lot.No.102511);TT试剂(Lot.No.101465);FⅧ(Lot.No.103821)，FⅦ(Lot.No.100708),FⅨ(Lot.No.100181)。

　　1.2 取样方法 随机抽取10份FFP，37℃水浴融化，融化后立即按无菌操作抽取血浆2 ml，随即在自动血凝仪上测定凝血因子。凝血因子测定方法严格按照CO1800全自动血凝仪操作说明和试剂要求，采用凝结光学检测法原理，对不同的检测项目利用不同的稀释度标准血浆凝结时间与相应的凝血因子活性率标绘于对数图上，绘制成标准曲线，然后测定受检血浆凝结时间与相应因子活性率所或获得数据带入回归方程，计算受检血浆中凝血因子活性水平。选用观察的指标为：PT、APTT、Fib、TT、FⅦ、FⅧ、FⅨ等。

　　2 结果

　　FFP凝血因子测定结果，见表1（略）。表1 10份FFP凝血因子测定结果注：INR是PT用国际标准化比值的表示。

3 讨论

　　血浆中不稳定的凝血因子(如FⅧ)因在体外半衰期较短，多为8～12 h，易丧失活性，加之血液离体后血浆凝血因子接触异物表面会有不同程度被激活而失去活性[1]。在FFP制备的同时，应尽量缩短FFP在室温的停留时间，在制作采血标签时，将即刻时间打在标签上，以便在成分分离血浆时，保证在6 h内把FFP放入-50℃。速冻血浆是保存血浆内各种有效蛋白成分及生物活性因子的重要条件。为了达到快速冷冻的目的，将制备的FFP直接放入-50℃冰柜中速冻。　我科凝血因子检测指标：PT(凝血酶原时间):是用于快速、敏感检测外源性凝血途径(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ)凝血功能紊乱的筛选，INR是PT用国际标准化比值来表示;APTT(活性部分凝血酶原时间):是用于内源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)活性异常的筛选;TT(凝血酶时间):是用于快速评定止血和血栓形成的有效办法，可以定量监测功能性纤维蛋白原(Fbg)水平[3]。FⅦ、FⅧ、FⅨ活性测定主要反映其本身因子活性水平，并能反映到APTT和PT时间的延长及因子含量的降低。

　　本实验中各个血液凝血因子平均水平均在正常范围内，说明血液中心在制备血浆过程中能严格执行卫生部输血技术规范要求[1]，基本达到临床治疗量的目的，尤其是不稳定凝血因子FⅧ活性，完全能保证不稳定因子的替代治疗作用。但本实验中发现仍有少量凝血因子未能达到正常水平，如APTT超出正常范围大于(35 s)1例，PT超出正常范围(14 s)1例，Fib低于正常者5例，FⅦ活性低于70%者1例，这些变化是否由于血浆制备或献血员本身原因引起有待进一步观察。而10份血浆中有5例Fbg含量低于2 g/L，这一点值得临床研究。

　　如今，成分输血在临床应用越来越广泛，特别是针对无相应的血液成分浓缩物可治疗的疾病或多种凝血因子缺乏的患者，采用输注FFP进行治疗，原因是FFP含有正常人血浆中大部分凝血因子，这是其它血液制品不可代替的，为保证准确有效的对疾病进行治疗，我们对血液中心提供的FFP进行凝血因子抽查，一方面可以反馈信息，使血液中心在制备FFP时，能从各个环节上进行质量把关、控制;另一方面，使我们对血液中心的FFP产品无论是从凝血子含量到活性水平，还是进行血浆用量计算等方面，都能作到有据可依，为临床治疗提供可靠的血液质量。

【参考文献】
  　[1] 中华人民共和国卫生部编.中国输血技术操作规程[M].天津:天津科学技术出版社,1997:1617.

　　[2] 李静旗,张 丽,宫本兰.冷链对新鲜冰冻血浆FⅧ活性的影响[J].临床输血与检验,2003,5(3):192193.

　　[3] 孟宪军.冷沉淀中FⅧ因子和纤维蛋白原含量测定[J].临床输血与检验,2003,5(3):124