二、快速检测新技术
1 3M测试片快速分析技术
1.1 3M测试片快速分析技术概念 3M测试片法是一种便捷可再生水化干膜，适用于细菌和真菌的计数。 
1.2 检测步骤
只需三步就可实现快速准确的测定。 
1.3结果判读 
①测试片中含有一种红色指示染剂可使菌落着色,计算所有红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计算之). ②测试片上没有任何菌落生长. ③有不多的菌落. ④测试片菌落数适宜计数范围是25-250 ⑤测试片面积约为500px2,当菌落数超过250个,如5所示,为了估计菌落数,可选择其中一个或数个有代表性菌落的小方格(25px2),计算平均菌落数,再乘以20可得到整个测试片上的菌落数. ⑥ 测试片上菌落太多而无法计数 ⑦有很多高数量菌落,使整个生长区变粉色，应计录为菌落太多无法计数。
⑧有时菌落分布出现不均衡,如8所示,这也记录为菌落太多无法计数。
⑨测试片上的菌落,最先粗略一看是可计数的,然而,你密切注意到生长区边缘,能看到高密度的菌落,应记录为菌落太多无法计数。
1.4 测试片法特点
1.4.1 工作效率的极大提高 根据大量数据统计，使用 3M测试片技术， 可以提高实验室工作效率 118% 以上。劳动资源的最佳使用带来生产能力的提高，最终的效果就是效益的增加。
1.4.2 标准化的检测方法
品质稳定的快速测试片克服了传统的测试方法存在的由于使用不同批次的培养基，不同的配制条件，不同配制人员而导致的差异性。
1.4.3 国际化的认证方法 3M快速测试的方法得到包括 AOAC，AFNOR 在内的国际权威机构的认证，在全球许多国家也已获得官方机构的正式批准，从而可以确保检测结果的可靠性和在世界各地的广泛认可。
1.4.4 快速得到检测结果 对比传统的测试方法， 3M快速测试片缩短检测时间，使您在更短的时间内获得样品的测试结果，能更加迅速地采取有效的措施解决发现的问题。 1.4.5 方便进行HACCP 认证由于检测速度快，检测项目全，准确性高。3M为食品生产工艺过程中关键控制点的监控提供了较为完整的系列产品，可以对包括生产线，生产设备和环境在内的各个环节进行全面的测试。
2 ATP法
2.1 ATP荧光法检测总菌落数原理
萤火虫会发光是由于它能合成将化学物质的化学能转变为光能的生物催化剂—荧光素酶、虫荧光素(D-luciferin)以及所有细胞生物都产生的生物能量物质—三磷酸腺苷（ATP）。在有氧的条件下，虫光素酶催化虫荧光素和ATP之间发生氧化反应，形成氧化荧光素并发出荧光，其生化反应式如下：
2.2 ATP法特点：
2.2.1 具有成本低，操作简单，响应速度快等特点 2.2.2 微生物 ＡＴＰ 生物发光法在国外已被广泛地运用于食品中菌落总数的测定。
3 MTT法
3.1 MTT法检测原理
检测原理为活体微生物线粒体中含有琥珀酸脱氢酶，能使外源性MTT（噻唑蓝）还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。Formazan结晶形成的量与活菌数成正比。用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活菌细胞数量。
3.2 应用实例1：巴氏消毒奶中活菌素快速检测
取巴斯消毒奶10mL ，至于无菌离心管中3000rpm离心5分钟，弃去上清。加入10mL无菌生理盐水洗涤离心管，再次3000 rpm离心5分钟，弃去上清取出奶液基质。加入1mL生理盐水重悬底部的微生物，取0.2mL到96孔酶标板中，同时加入标准菌液做标准曲线，统一加入底物反应30分钟，读数。 
3.3 该方法的特点：检测快速，灵敏度高。
4 流式细胞术
4.1 流式细胞术检测原理 检测原理：细胞经特异荧光素标记后，通过激光照射，产生特异荧光信号，通过对这些荧光信号的检测和定量计算出菌群总数。 
4.2 特点：快速、便捷结果可靠、便于操作。
结语
菌落总数是微生物检测中最常见的项目，在检验的每一个环节都应该小心谨慎，精准操作，确保检测结果的准确度。国标法采用的平板计数法是我们最常用的检测方法，但是操作过程较为复杂，时间较长；而其他方法操作简便，省时，但是有的成本相对较高，并且有的只针对特定的食品种类。我们应该积极关注新的科学技术在检测方法中的应用，让检测更加精确、经济、便捷和可靠。
参考文献： [1]GB4789.2-2010，食品微生物学检验菌落总数测定[S]．北京：中国标准出版社，2010 [2]黄伟伟，食品中菌落总数的国标法测定注意事项及快速检测技术.台湾农业探索，2012（6）. [3]卢崇南，刘毅，吴达勇.ｐＨ值对菌落总数检测结果的分析[J]．国际医药卫生导报，2005(15) ：121-122. [4]王晓文，张俊伟 ．TTC 应 用 于 食 品菌落总 数 测 定 的 研 究[J]． 辽宁大学学报,2011，38(1)：86-89.
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