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34招教你学会实验室常用贮存液的配制技巧(二)

2019.10.08
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

  13 0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

  『配制方法』

  在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用.

  〖注意〗EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解.

  14 溴化乙锭(10mg/ml溶液)

  『配制方法』

  在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温,

  〖注意〗

  溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩.

  15 2×HEPES缓冲盐溶液

  『配制方法』

  用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml. 用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃.

  16 IPTG溶液

  『配制方法』

  IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.

  17 1mol/L乙酸镁溶液

  『配制方法』

  在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌.

  18 1mol/L MgCl2溶液

  『配制方法』

  在800ml水中溶解203.4g MgCl2‘’6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用.

  〖注意〗

  MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放.

  19 β-巯基乙醇(BME)溶液

  『配制方法』

  一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃.

  〖注意〗

  BME或含有BME的溶液不能高压处理.

  20 NBT溶液

  『配制方法』

  把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.

  21 酚/氯仿溶液

  『配制方法』

  把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L TriHCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Trisl(pH7.6)液层,保存于4℃.

  〖注意〗

  酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服.所有操作均应在化学通风橱中进行.与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇.

  22 苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液.

  『配制方法』

  用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃.如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L).

  〖注意〗

  PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之.被PMSF污染的衣物应予丢弃.PMSF在水溶液中不稳定. 应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中. PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃. pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃.

  23 磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

  『配制方法』

  在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min. 保存于室温.

  24 1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液

  『配制方法』

  将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃.

  25 乙酸钾溶液(用于碱裂解)

  『配制方法』

  在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液.

  26 乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液

  『配制方法』在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2或用稀乙酸调节 pH值至7.0,加水定容到1L,分装后高压灭菌.


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