食品中淀粉的测定——酸水解法

一、原理：

样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。

二、试剂：

1、乙醚；

2、85％乙醇溶液；

3、6N盐酸溶液；

4、40％氢氧化钠溶液；

5、10％氢氧化钠溶液；

6、甲基红指示液：0.2％乙醇溶液

7、精密PH试纸

8、20％乙酸铅溶液

9、10％硫酸钠溶液

10、乙醚

11、碱性酒石酸铜甲液。  (配制见前)

12、碱性酒石酸铜乙液；  (配制见前)

13、硫酸铁；  (配制见前)

14、0.1000N高锰酸钾标液

三、仪器：

1、水浴锅

2、高速组织捣碎机：1200r／min

3、皂化装置并附250毫升锥形瓶。

四、操作方法：

1、  样品处理

A、粮食，豆类、糕点、饼干等较干燥的样品，称取2.0-5.0克磨碎过40目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30毫升乙醚分三次洗去样品中的脂肪，弃去乙醚。再用150毫升85％乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以100毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至250毫升锥形瓶中，加入30毫升6N盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2小时。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入2滴甲基红指示液，先以40％氢氧化钠溶液调至黄色，再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密PH试纸测试，使样品水解液的PH约为7。然后加20毫升20％乙酸铅溶液，摇匀，放置10分钟。再加20毫升10％硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20毫升，滤液供测定用。

B、蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品：按1：1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干、取可食部分)称取5-10克匀浆(液体样品可直接量取)，于250毫升锥形瓶中，加30毫升乙醚振摇提取(除去样品中脂肪)，用滤纸过滤除去乙醚，再用30毫升乙醚淋洗两次，弃去乙醚。以下按A自“再用150毫升85％乙醇溶液”起依法操作。

2、测定：

吸取50毫升处理后的样品溶液，于400毫升烧杯内，加25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液。于烧杯上盖一表面皿加热，控制在4分钟沸腾再准确煮沸2分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水，用玻棒搅拌使氧化铜完全溶解，以0.1000N高锰酸钾标液滴定至微红色为终点。

同时吸取50毫升水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲乙液、硫

酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白试验。

计算： x2=((A₃-A₄)×0.9)/( M₂×V₂/500×100)------------------------×100

式中：

X₂：样品中淀粉含量，％；

A₃：测定用样品中水解液中还原糖含量，mg；

A₄：试剂空白中还原糖的含量，mg；

m₂：样品质量，mg；

V₂：测定用样品水解液体积，m1；

500：样品液总体积，ml；   

0.9：还原糖折算成淀粉的换算系数。