实验方法原理 | 将细胞依次置于浓度逐渐增加的叶酸拮抗剂中,如氨甲蝶呤(MTX ) 中,经过一段时间,细胞会产生对药物毒性的抵抗 [ Biedler et al ,1972 ],这是 DHFR 基因扩增的结果,这种抗性通常产生得非常快,当然可能还有其他机制部分或全部参与到抗性表型的形成中,比如,抗叶酸转运方面的改变和(或)突变影响酶结构或亲和力。 |
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实验材料 | 中国仓鼠细胞或生长快的人或小鼠细胞系 氨甲蝶呤钠盐 |
试剂、试剂盒 | 0.15mol LNaCl |
仪器、耗材 | 组织培养瓶 吸管 不含胸苷和次黄嘌呤的培养瓶 倒置显微镜 液氮罐 |
实验步骤 |
1. 克隆培养亲代细胞形成生长旺盛、基因型一致的细胞群体,用于筛选。 展开 |