大鼠ELISA试剂盒检测系统可谓是免疫学反应应用到科研出产中zui为广泛zui为敏捷的技术手段。自己也为此苦恼过很长一段时间，跟着自己技术水平得进步，或多或少地也把握了ELISA体系的脾气，也是熟能生巧吧，现在做方阵，做大鼠ELISA试剂盒已是轻车熟路了，以前检测一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的，现在给我十个八个的从包被到显色，一个工作日基本搞定。可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目，本人在刚开始做ELISA时就面对良多灾题，固然有师兄师姐铺路，但仍是经常做得乌烟瘴气，好比说花板，假阳性，全显色，全部显色，显色比空缺还低。
操作步骤
①兔抗人IgG 作为抗原，用包被液l：8000稀释，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反应板中。4℃放置过夜。
②洗涤：次日倾去凹孔内的液体，洗涤液洗3次。
③封闭：加l00μL/孔封闭液，室温放置0.5h。
④洗涤：用洗涤液洗3次。
⑤加待测样品(一抗)：将含单克降抗体的细胞培养上清在另-块板上用PBS 连续稀释(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每个样品平行做两份，PBS或空白培养基作为阴性对照，大鼠ELISA试剂盒已知样品作为阳性对照。加盖37℃恒温箱温育 1~2h。
⑥洗涤：用洗涤液洗3次。
⑦加酶标抗抗体：兔抗鼠IgG-HRP，用封闭液l ：8000稀释，100μL／孔，加盖37℃恒温箱温育1h。
⑧洗涤：用洗涤液洗5次，蒸馏水洗2次。
⑨显色：加新鲜配制的底物溶液100μL/孔，室温暗处放置5～30min，显示蓝色。
⑩终止反应、比色：加50μL/孔终止液。颜色变黄；大鼠ELISA试剂盒用酶标仪测定450nm 处各孔的吸光值，阳性反应的zui大稀释度为待测样品的效价。
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