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电泳色谱仪的分离模式

2019.12.20
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

电泳是电解质中的带电粒子在电场作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用电泳现象对化学和生物化学组分进行分离的仪器称为电泳色谱仪(简称电泳仪),电泳仪的分离模式有区带电泳、移界电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。

一、区带电泳:

不同的离子成分在均一的缓冲液中分离成独立的区带,可用染色等方法显示出来,用光密度计扫描可得到一个个互相分离的峰。电泳区带随时间延长和距离增大而扩散严重,影响分辨率。加入介质可减少扩散,特别是在凝胶中进行电泳,凝胶兼具分子筛的作用,分辨率大大提高,是应用最广泛的电泳技术。

二、移界电泳:

移界电泳只能起到部分分离的作用,如将浓度对距离作图,可得到一个个台阶状的图形,zui前面的成分有部分是纯的,其它则互相重叠。各界面可用光学方法显示。这是zui早的电泳技术。

三、等速电泳:

等速电泳是在电泳达成平衡后,各区带相随,分成清晰的界面,以等速移动。按距离对浓度作图也是台阶状,但不同于移界电泳,它的区带没有重叠,而是分别保持。

四、等电聚焦:

由多种具有不同等电点的载体两性电解质在电场中自动形成pH梯度,被分离组分各自移动到其等电点而聚成很窄的区带,分辨率很高。

由于电泳具有分辨率高、快速和简便等优点,应用十分广泛。从分离与分析无机离子到复杂的生物高分子化合物,在放射化学和免疫化学中占有重要的地位,在生化实验室和生化工业方面应用更为普通,医药领域可用作临床诊断。在电泳技术中,尤以凝胶电泳分离酶、蛋白质和核酸等生物大分子等的分辨率为最高,为生物化学和分子生物学的发展作出了重大贡献。


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