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大鼠肾损伤分子-1(Kim-1)elisa试剂盒操作说明

2020.2.03
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

注意事项:

  1. 试剂盒使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。

2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。

4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。

5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用zui低频率),如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。

6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。

7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。

8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。

操作过程:

1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。

2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。

3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。

4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。

5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。

6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。

7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。

8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。

9)在450nm波利益测定各孔的OD值。

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