泛素(Ubiquitin,Ub)对蛋白质的翻译后修饰,对它们的区室化,降解和功能产生了深远的影响。单个Ub与靶蛋白的结合被称为单泛素化,另外的Ub部分可以与该初始Ub缀合,形成多聚泛素(polyUb)链。这些polyUb链通过Ub的C末端与靶蛋白的赖氨酸之间形成异肽键而连接。PolyUb链本身通过各个单体Ub单元之间的类似缀合机制形成,并且可以通过Ub中存在的所有赖氨酸(K6,K11,K27,K29,K33,K48和K63)连接。
两种表征的最充分的多泛素化形式是通过连接在赖氨酸48(K48)或赖氨酸63(K63)上发生的。K48连接多聚泛素化最常见的后果是蛋白酶体介导的降解,而K63连接的多泛素化修饰与其他细胞过程有关,DNA损伤反应的调节,胞内分选,错误折叠/聚集蛋白的自噬和神经变性。其它赖氨酸的多聚泛素蛋白连接尚不显著,其生理作用仍然大部分未知。
什么是TUBE?
TUBE(Tandem Ubiquitin Binding Entities, 串联泛素结合实体),基于已知具有对泛素亲和力的蛋白质结构域,经过深度整合,创造性地开发出了TUBEs结合实体。与单泛素结合相关结构域(UBA)相比,TUBE对多泛素部分的亲和力可增加高达1000倍。此外,TUBE对多泛素化蛋白质具有保护作用,允许以相对低的丰度进行检测。这些特性有助于有效地“捕获”多泛素化状态的蛋白质。
如何从细胞和组织提取物中有效分离和富集K48-多聚泛素以便用于蛋白质组学的研究?
您推荐由泛素研究的引领者推出的高品质高性能的K48泛素链特异性的串联结合实体(K48 TUBE HF),已被广大泛素领域科学家广泛使用。
PS:
与其它连接类型相比,K48泛素链特异性的串联结合实体K48-TUBE HF(高保真的第二代)对K48链的多聚泛蛋白的亲和力和选择性会强上100倍,是一种极度灵敏且经济的工具。此外,LifeSensors公司对于K48-TUBE HF进行了不同的标签修饰,可以满足不同研究者的多样化实验需求。
K48泛素链特异性的串联结合实体优点:
对K48多聚泛素链的纳摩尔亲和力;
对K48多聚泛素链的亲和力与其它所有连接相比高100倍;
与大多数泛素抗体相比,TUBE对多聚泛素的亲和力更高;
避免表位标记的泛素过表达导致下拉。
【测试结果】:
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