贝类毒素的LC-MS/MS检测

贝类毒素经常能导致中毒事件，因此建立一种高灵敏度、高特异性的检测方法非常重要。本文开发了串联四级杆质谱MRM扫描方式测定生物毒素AZA1的方法，选择性好，灵敏度高，检测结果可达0.001 pg/μl，在复杂基质低浓度时表现出了很好的重现性，克服了传统方法检测灵敏度低、结果假阳性等缺点。

生物毒素是一类生物源小分子化合物，近年来，沿海地区频繁出现Azaspiracid（AZA）导致的中毒事件，可引起恶心、呕吐、腹泻、胃痉挛等中毒症状，给水产品质量安全工作带来了挑战。本文以原甲多藻酸类贝毒素AZA1为例，开发了一种高灵敏度、高特异性的生物毒素液质检测方法。

实验部分

仪器与试剂

美国AB SCIEX API4000 液相色谱-串联四极杆质谱联用仪，配有电喷雾（ESI）离子源；试剂为Merk公司的色谱纯级甲醇、乙腈、水，以及Fluka公司的色谱纯级甲酸、甲酸铵。

色谱条件

液相色谱：Shimadzu UFLC 系统；色谱柱：Symetry 2.1mm×100mm，3.5μm；流动相A：含1mM甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液；流动相B：含1mM甲酸铵和0.1%甲酸的乙腈/水（90%，V/V）溶液流速：0.3ml/min。

质谱条件

API4000系统；离子源：Turbo VTM；

离子化模式：TurboIonSpray（+ESI）

结果与讨论

方法灵敏度

通过MRM定量方式，选择性强，能消除干扰，定量下限0.001pg/μl的AZA1标准溶液（MRM842.6/824.6）的色谱图的响应为3347psi, 信噪比为39.3，图谱如图1所示。

工作曲线和重现性

AZA1在0.01pg/μl到20pg/μl之间显示了良好的线性关系，r为0.9992。重复进样6次，LOQ为0.001pg的重现性为 2.14%，0.005 pg的重现性为0.58%，0.01pg的重现性为3.38%，0.1pg的重现性为1.28%，1pg的重现性为21.28%，20pg的重现性为0.48%。图2为AZA1的工作曲线。

小结

API4000系列串联四级杆通过MRM扫描方式建立测定生物毒素AZA1的方法，选择性好，灵敏度高，检测结果可达0.001pg/μl；在复杂基质低浓度时表现出了很好的重现性，克服了传统方法检测灵敏度低、结果假阳性等缺点。