肿瘤动物模型的构建——淋巴瘤篇

淋巴瘤（Lymphoma）是一种原发于淋巴结和淋巴组织的恶性肿瘤。近年来其发病率正以每年4%的速度上升。初期往往仅因表现为持续发烧或淋巴结肿大，而被大家忽视。加上淋巴瘤亚型（＞80种）众多，治疗困难重重。因此迫切需要建立正确的动物模型，这对于研究淋巴瘤的发病机制和治疗手段十分重要。

淋巴瘤为全身性肿瘤？

淋巴系统像血液系统一样遍布全身，所以淋巴瘤几乎可以发生在身体的任何部位。如果淋巴瘤细胞浸润进血液，则发展成淋巴细胞白血病(lymphoma cell leukemia，LCL)，变成液体瘤，成为全身性肿瘤。

如下图：人体淋巴组织分布和淋巴瘤后期转移示意图（图片来自Zevalin网站）。

淋巴瘤分类众多

淋巴瘤种类繁多，发病机制复杂，分为霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）两类，其中以生发中心（Germinal center）来源的淋巴瘤占到NHL的80%，包括伯基特淋巴瘤，滤泡性淋巴瘤和弥漫大B淋巴瘤。其发病机制是B细胞经历生发中心不同阶段时，基因发生突变易位等。

生发中心来源淋巴瘤发病机制示意图[1]

临床上根据淋巴瘤分类分为多种细胞株，下面列举一些常用淋巴瘤细胞株：

下面说说常见的淋巴瘤动物模型有哪些

一、异种移植型淋巴瘤模型

淋巴瘤细胞株或病人淋巴瘤组织种植于免疫缺陷动物体内，建立移植性淋巴瘤模型，是目前研究最多的肿瘤模型。

一般选择免疫缺陷小鼠：SCID小鼠或NOD/SCID小鼠

淋巴瘤动物模型常选用SCID小鼠，它是一种先天性T/B淋巴细胞联合免疫缺陷动物，移植成功率比较高。但SCID小鼠仍残留某些免疫功能，而NOD/SCID小鼠较SCID小鼠出现更多的免疫缺陷，它又降低了NK细胞的活性，成为淋巴瘤实验研究的有效工具。

异种移植进一步又分为细胞移植（CDTX）和组织块移植（PDTX）

操作步骤如下图所示[2]：A（CDTX）和B（PDTX）

注意：

（1）细胞移植法：常用皮下荷瘤，也用腹腔注射，静脉注射和原位荷瘤。荷瘤细胞数目一般在10⁷~10⁸，数目过少很难成功。根据淋巴瘤类型选择合适的细胞株，根据实验目的选择不用的荷瘤位置。

（2）组织块移植法：来源于肿瘤手术的标本移植于小鼠体内，必须要求组织块新鲜、无坏死、无包膜，移植时切成1-3mm³小块置于生理盐水或磷酸盐缓冲液内备用，必须无菌操作。

二、基因工程型淋巴瘤模型

淋巴瘤种类繁多，不同基因突变导致产生不同淋巴瘤，因此基因修饰的淋巴瘤模型，对于研究不同类型的淋巴瘤发病机制及药物研发非常重要。

如Eμ-MYC转基因小鼠模型，是将MYC基因插入到IgH位点，模拟人体内染色体易位所致c-myc的表达模式，数月内B细胞淋巴瘤发生概率100%（下表1）。下表为不同类型的淋巴瘤的转基因小鼠模型[2]

三、诱发型淋巴瘤模型

运用物理、化学和生物等方法与动物特定部位直接或间接接触，使靶器官产生肿瘤。其操作相对简便，常用诱导剂成瘤机制清楚，成瘤率较高，是一种较好的建立肿瘤模型的方法。

如C57BL/6J小鼠全身辐射γ射线，每周一次，持续四周则有90%的小鼠被诱发为胸腺T细胞淋巴瘤[3]。

综上所述，随着对淋巴瘤研究的不断深入，淋巴瘤造模领域取得了诸多进展。为了更加准确全面认识淋巴瘤的发病机理及治疗方式，选择正确的动物模型，至关重要。

参考文献

[1] Basso, K. & Dalla-Favera, R. Germinal centres and B cell lymphomagenesis. Nature reviews. Immunology 15, 172-184 (2015).

[2] Kohnken, R., Porcu, P. & Mishra, A. Overview of the Use of Murine Models in Leukemia and Lymphoma Research. Frontiers in oncology 7, 22 (2017). 

[3] Herranz, M., et al. The novel DNA methylation inhibitor zebularine is effective against the development of murine T-cell lymphoma. Blood 107, 1174-1177 (2006).