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肿瘤动物模型建立实验(一)

2020.8.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理

诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。

实验材料 肿瘤细胞小鼠

试剂、试剂盒 无血清培养基质3%中性甲醇石腊

仪器、耗材 低温离心机血球计数器游标卡尺

实验步骤

一、肝癌 


1.二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌


(1)取体重250 g左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘;


(2)按性别分笼饲养。除给普通食物外,饲以致癌物,即用 0.25%DEN水溶液灌胃,剂量为10 mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用;


(3)共约4个月可诱发成肝癌;


(4)也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。


2.4-2甲基氨基氮苯(DBA)诱发大鼠肝癌


(1)用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠,饲料中维生素B2 不应超过1.5~2 mg/kg;


(2)4~6月就有大量的肝癌诱发成功。


3.2-乙酰氨基酸(2AAF)诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌


(1)给成年大鼠含0.03% 2AAF标准饲料;


(2)每日每平均2~3 mg 2AAF(也可将2AAF混于油中灌喂),3~4月后有80~90%动物产生肝肿瘤。


4.二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌:


(1)用剂量为每日0.3~14 mg/kg体重,混于饲料或饮水中给予;


(2)6~9个月后255/300大鼠发生了肝癌。


5.亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌


(1)用1%OAAF苯溶液(约0.1 ml含1 mg)涂在动物的两肩胛间皮肤上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次。


(2)实验后7~8周即而出现第一个肝肿瘤,7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。


(3)或用2.5 mg OAAT溶于葵瓜子油中,给C3H小鼠皮下注射4次,每日间隔10天,也可诱发成肝癌。


6.黄曲霉素诱发大鼠肝癌


(1)每日饲料中含0.001~0.015 ppm,混入饲料中喂6个月后,肝癌诱发率达80%。

 

二、胃癌 


1.甲基胆蒽诱发小鼠胃癌


(1)取20 g左右的小鼠,无菌手术下,在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆蒽(MC)线结。


(2)含MC的线结是用普通细线,在一端打结后,将线结置于盛有MC小玻璃试管内,在酒精灯上微微加温,使MC液化渗入线结。MC浓度为0.05~0.1 g 20-甲基胆蒽内浸入10~20根线。


(3)手术埋线后4~8个月可诱发成功胃癌。


2.不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌


剂量为0.25 ml/kg体重,3个月后全部动物发生前胃乳头状癌,7~8个月后有85~100%发生前胃癌。昆明种最敏感。A系次之,615系小鼠敏感性最差。


3.甲基亚硝基醋酸尿素诱发小鼠胃癌


给BD大鼠饮水中加甲基亚硝基醋酸尿素,剂量为2 mg/kg体重,每周饮用5次,520天后全部大鼠均发生了腺胃癌。

 

三、食管癌 


1.甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发大鼠食管癌


(1)取体重100 g以上的Wistar大鼠;


(2)任其食用含甲基苄基亚硝胺的饮水,并将MBNA掺入饲料中使每日摄入量达0.75~1.5 mg/kg体重;


(3)80~100天可诱发成食管癌。




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