背景:来源于脂肪细胞的瘦素在人类和小鼠的青春期发育中起着重要作用,联系着能量存储和青春期发育的开始。研究表明瘦素通过弓状核中表达kisspeptin的神经细胞来发挥调节作用。本文进一步研究了瘦素单独作用于Kiss1细胞能否启动小鼠青春期发育。
方法:实验采用雄性、雌性的Kiss1-Cre、LepR null、LepR-IPES-Cre、R26 GFP、Kiss1-hrGFP和C57BL/6小鼠为实验对象,每天对雌性小鼠进行发情周期检查,并在灌注前7到10天进行双侧卵巢切除。
实验小鼠饲喂正常饲料,并在13到35周龄对小鼠进行测量,每周进行一次体重称量,在第20、28和35周龄时进行体成分分析。
Echo MRI型号:EchoMRI-100(Houston, TX, USA);
结果:
AKR/J小鼠中脂联素和其受体的表达分析
将重组质粒通过水动力输送法注射进小鼠体内后,检测体内这两种基因的表达情况。
Fig.1. 注射后脂联素和其受体的表达变化分析
a:脂联素mRNA表达;b:脂联素受体2mRNA表达
c:血液中脂联素含量;d:肝脏中脂联素受体2的蛋白表达分析
2. 注射后HFD诱导的AKR/J小鼠体重变化
Fig.2. 注射重组基因后小鼠体重及体成分变化
a:雄性AKR/J小鼠生长曲线;b:雄性AKR/J小鼠筋肉含量变化
c:雄性AKR/J小鼠脂肪含量变化;d:小鼠food intake/Body weight
e:雌性AKR/J小鼠生长曲线;f:第八周雌性AKR/J小鼠脂肪和筋肉含量变化
3. 注射脂联素及其受体重组质粒后改善了胰岛素敏感性
Fig. 3 注射相关重组质粒后HFD小鼠胰岛素敏感性变化
a:注射葡萄糖后血糖浓度变化;b:AKR/J小鼠葡萄糖耐受性实验
c:注射胰岛素后血糖浓度变化;d:第八周雄性小鼠胰岛素含量
e:HOMA-IR value;f:肝脏中相关基因表达
结论:本文采用水动力输送法将脂联素及其受体注射入AKR/J小鼠体内,增加目的基因的表达,抑制了HFD诱导AKR/J小鼠的体重增加、脂肪含量积累和胰岛素的敏感性。