数字 PCR( digital PCR ,dPCR ) 下一代DNA/RNA扩增技术。原理是将一个PCR 反应体系分配到大量微小的反应单元中,在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ,进行“单分子模板”PCR 扩增。扩增结束后,通过阳性反应单元( 通过终点荧光信号判断) 的数目和统计学方法计算原始样本中目标基因的拷贝数。无需依赖于对照样品和标准曲线就可以进行精确的绝对定量检测。
作为灵敏度最高的技术,数字PCR已证明了它在绝对量化等应用中的可靠性,包括稀有突变检测(如液体活检中肿瘤导致的突变),基因表达和microRNA定量检测,拷贝数变异(CNV)的精确识别以及下一代测序文库定量等。 从科学研究到生物技术,制药领域到工业生产,数字PCR正在迅速成为所有实验室的主流技术。
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