Tol2转座子
提及转基因，大家首先映入脑海的是什么呢？转基因大豆？玉米？食用油？（对于那些一个都想不到的孩纸们，小编我只想哭晕在厕所）名词很熟悉，各大超市随处可见，可何为转基因，如何得到转基因产品？今天小编简单来跟大家聊一聊。
所谓转基因，顾名思义，就是外源基因整合进入宿主基因组，目前哺乳动物系统最常用的转基因技术主要包括Sleeping beauty(SB)，PiggyBac(PB)以及Tol2转座子系列，然而，其中的“明星转座子”当属Tol2！
1、Tol2转座机制
Tol2转座子是Koga等人在日本青鳉鱼中发现，属于hAT转座子家族，全长4682bp，末端分别为17bp和19bp的反向重复序列，包含4个外显子（图1），编码蛋白含有649个氨基酸残基。
Tol2作为一个自主的转座元件，自身可以编码转座酶，且迄今为止，是在脊椎动物中发现的唯一具有自主转座活性的转座子[1]。将转座酶编码区序列部分缺失， 但保留转座酶识别和结合区域序列，Tol2便无法发生自主转座（图1）。
图1 Tol2转座子序列[1]
利用这一特性，可以以外源基因替代转座酶编码序列，构建Tol2转座载体，与转座酶cDNA载体质粒共转入宿主细胞，外源基因便会以“剪切-粘贴”的方式整合入基因组中且不会引起任何靶位点的重排和修饰[2], 如图2.
图2 Tol2转座机制[2]
2、Tol2应用
Tol2转座子具有不定向性，即在基因组中是随机插入，并无序列特异性，那既然Tol2都如此任性了，留之何用呢？
起初，科学家们利用这一特性，将其作为基因捕获和增强子捕获的工具以进行突变体筛选，从而确定机体发育过程中重要功能基因的突变体。但随着科学技术的不断进步，自动化的基因高通量筛选鉴定早已不在话下，以为tol2会就此淘汰？不存在的！如今的tol2转座子依旧在建立稳定基因表达细胞系和转基因大、小鼠的制备等方面发挥着其独特的技术优势。
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