RNAplant植物RNA提取试剂使用说明

简介：

RNAplant试剂可从植物组织，特别是富含多酚或淀粉的植物组织中（如马铃薯块茎，白松松针或嫩苗，和西红柿叶等）提取高纯度的总RNA。

每100 ml可处理100 mg组织200次。

保存条件：室温运输，4℃保存，可保存6-12个月。 

准备试剂：液氮，研钵，无RNase离心管，5 M NaCl（无RNase水配制），氯仿，异丙醇，75%乙醇（无RNase水配制），无RNase水。

小规模提取操作步骤：（样品<0.1 g ，使用小规模提取方法）：

1.取不多于0.1 g植物组织，在液氮中研碎，转移到1.5 ml 离心管中，加0.5 ml提取试剂，振荡至彻底混匀。

注：振荡不要太剧烈，否则容易导致基因组DNA污染。

2.室温放置5分钟。

3.4℃ 12, 000 rpm离心2-3分钟，上清转入新的无RNase离心管。

4.上清中加入0.1 ml5 MNaCl（无RNase水配制），温和混匀。

5.加入0.3 ml 氯仿，上下颠倒混匀。

6.4℃ 12,000 rpm离心10-15分钟，取上层水相转入新的无RNase离心管。

7.加与所得水相等体积的异丙醇，混匀，室温放置10分钟。

8.4℃ 12,000 rpm离心10-15分钟。弃掉上清，注意不要倒出沉淀。加1 ml 75%乙醇冲洗沉淀。（沉淀可能很难看见，应小心操作。）

9.4℃ 5000-7000rpm离心3分钟。倒出液体，注意不要倒出沉淀。剩余的少量液体短暂离心，用枪头吸出，室温晾干1-2分钟至沉淀干燥。

10.加适量无RNase水充分溶解RNA，-70℃保存。

注意事项：

RNAplant有刺激性味道，操作时请在通风处进行。