3.6 回收率
分别取不同量的替加环素加入到空白血浆中，配成0.2mL的浓度分别为10，100，1600ppb 的标准含药血浆，按“血浆样品处理”项下操作，记录样品峰面积与内标峰面积ƒx(ƒx=As'/Ai）；10，100，1600ppb 样品直接进样后记录峰面积与内标峰面积比值ƒs(ƒs=As/Ai）, 计算ƒx 和ƒs 的比值即得到替加环素的回收率，平行操作5 次，结果见表8。
表8. 血浆中替加环素的回收率（n=5）
4. 方法学小结
本实验建立了测定血浆中替加环素的LC-MS/MS 测定方法，采用适当的样品前处理方法，血浆中的杂质不干扰样品的测定，标准曲线线性范围为5ppb-2000ppb, 线性关系良好，最低定量限为5ppb；方法学确证的高、中、低三种浓度的批间和批内变异均小于10%；准确度为95.05%-102.35%；回收率为93.96%-105.63%；血浆中的替加环素在室温放置4h、反复冻融3 次、处理后的样品在自动进样器放置24h 以及在-80℃冰箱冷冻两周和四周，样品依然稳定，符合生物样品测定要求。
5. 血浆样品测定结果
受试者连续多次给予药物替加环素后，血浆中的替加环素浓度见表9。
表9. 受试者的替加环素血浆药物浓度
6. 结论：
TSQ Vantage 三重四极杆液质联用系统检测血浆中替加环素具有灵敏度高、特异性好的优点，检测限可以做到100ppb；该方法具有宽的线性范围（5ppb-2000ppb），良好的精密度和准确度；同时使用20% 的三氯乙酸沉淀蛋白的方法处理血浆样品，简单快捷，空白基质没有干扰，回收率可以达93.96%-105.63%，证明该方法检测血浆中的替加环素具有很好的适用性。
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