芎归汤有效组分抗东莨菪碱致痴呆模型学习记忆能力...一

芎归汤有效组分抗东莨菪碱致痴呆模型学习记忆能力减退量-效关系研究

水迷宫和跳台实验相关文献：芎归汤有效组分抗东莨菪碱致痴呆模型学习记忆能力减退量-效关系研究

摘 要 目的：对芎归汤有效组分抗东莨菪碱致痴呆小鼠学习记忆能力减退的改善作用进行药效评价，并确定芎归汤有效组分对抗痴呆模型改善学习记忆药理学效应的" 量-效" 关系和 ED50，为进一步开展药效评价提供剂量依据。方法：取昆明种小鼠进行Morris 水迷宫、跳台筛选训练，将合格的小鼠 80 只，雌雄各半，按体重随机分为正常对照组、东莨菪碱致痴呆模型组、药效剂量 1 ～ 5 组和阳性药组，实验前分别给予各自治疗药物，连续给药 30 天后，除正常对照组外均腹腔注射东莨菪碱造模，30 min 后进行Morris 水迷宫实验及跳台实验，分析比较不同剂量组之间学习记忆能力差异性。结果：小鼠 Morris 水迷宫实验显示，芎归汤有效组分对东莨菪碱致痴呆小鼠学习记忆能力减退有明显改善作用，可以明显缩短小鼠水迷宫潜伏期，在 10． 92 ～ 43． 68 g/kg 剂量范围内均有显著性差异，且呈现一定的剂量依赖性，其 ED50为 4． 79g/kg。小鼠跳台实验显示，芎归汤有效组分对东莨菪碱致痴呆小鼠学习记忆能力减退有明显改善作用，可以延长小鼠跳台潜伏期和减少跳台错误次数，在 2． 73 ～ 43． 68 g/kg 剂量范围内均有显著性差异，且呈现一定的剂量依赖性，其 ED50为 2． 70g/kg。结论：芎归汤有效组分对东莨菪碱致小鼠学习记忆能力减退有明显的改善作用，并且随着剂量的增加药效越来越明显，呈现一定的剂量依赖性，具有明显的" 量-效" 关系。

关键词 芎归汤有效组分; 东莨菪碱痴呆小鼠; Morris 水迷宫实验; 跳台实验; 学习记忆能力; " 量-效" 关系

阿尔茨海默病( Alzheimer disease，AD) 又称老年性痴呆，是严重威胁着老年人群的身心健康与生命安全的重大疾病。现代研究证实，阿尔茨海默病是一种进行性神经退行性疾病，伴有认知及行为障碍，其发病机制相当复杂，涉及多系统、多环节的异常。由于其起病隐匿、病因不明、治疗时间长、治疗和护理费用昂贵等原因，己成为世界上继心脏病、肿瘤和中风之后的第 4 位死亡原因。因此，衰老及抗痴呆药物的研究已成为老年医药学领域的重点，越来越受到人们的关注。芎归汤是本实验研制的，由川芎、当归、淫羊藿组成的具有行气活血、温肾强志之功效的中药复方制剂，但是由于中药本身成分复杂，作用多样的药效学特点，其对不同病因病机引起的痴呆病症药效学关系研究较少，因此有必要在经典的东莨菪碱致痴呆模型的基础上，应用 Morris 水迷宫和跳台实验对其进行药效学相关性研究，研究结果如下:

1 材料

1.1 试验药物 川芎、当归、淫羊藿，分别按照 2010 版中国药典，经国家中药创制项目组鉴定为伞形科植物川芎( LigusticumChuanxiong Hort．) 的干燥根茎，批号 20110312; 伞形科植物当归( Angelia Sinessis( oliv．) Diels) 的干燥根，批号 20110305; 小檗科植物淫羊藿( Epimedium brevicornu Maxim) 的干燥叶，批号20100328。均由安徽世贸医药有限公司提供。芎归汤由川芎、当归、淫羊藿按照 4: 2: 1 组成( 川芎 24 g，当归 12g，淫羊藿 6 g，70 kg 人每日用量为 42 g。称取川芎、当归适量，适当粉碎后，置于 3000 ml 圆底烧瓶中，加入 12 倍量水浸泡 3h，于电热套中加热冷凝回流至挥发油不再增加，收集挥发油，记录体积( ml) 。药液于 4 层纱布过滤，收集水提液，浓缩。滤渣加处方比例的淫羊藿适量，置于 3000 ml 圆底烧瓶中，分别加入10 倍、8 量70% 乙醇加热冷凝回流 2 h 和 1.5 h，6 层纱布过滤，合并两次醇提液，回收乙醇后浓缩。醇提浓缩浸膏与水提浓缩浸膏混合，再将挥发油与吐温以 1: 1 比例研磨混匀，加入混合浓缩液中得最终芎归汤工艺一药物浸膏，得率: 39． 70%，批号: 2011040101。结合原处方人用量、药学各部分提取率和药效预实验数据，按人日用量以体表面积折算小鼠剂量的 8、4、2、1、0.5 倍为给药剂量，剂量大小为 43.68 g/kg、21.84 g/kg、10.92 g/kg、5.46g / kg、2.7 g / kg，按等体积不同浓度原则配置，各组灌胃体积均按 25 ml/kg 计算。盐酸多奈哌齐分散片，规格: 每片含盐酸多奈哌齐 5 mg，山东罗欣药业股份有限公司生产，批号: 091243，按人日用量以体表面积折算小鼠剂量的 2 倍为给药剂量，剂量大小为 1.3mg/kg，按 25 ml / kg 体积灌胃。

1.2 动物 昆明种小鼠，SPF 极，体重 18.0 ～ 22.0g，雌雄各半，SPF 级，由山东大学动物实验中心提供，合格证号: SCXK ( 鲁)20090001。给予 SPF 级普通小鼠饲料饲养( 山东大学动物实验中心提供，实验动物配合饲料( 鼠) ，生产许可证号: SCXK( 鲁)20090014) 。

1.3 试剂 东莨菪碱氢溴酸盐，纯度 ≥ 99.0% ，苏州工业园区亚科化学试剂有限公司生产，批号: YK2011031201。临用时用蒸馏水配置成 2 mg/kg 浓度，按 3 ml/kg 体积腹腔注射给药。

1.4 仪器 XR-XM101 Morris 水迷宫视频跟踪分析系统，上海欣软信息科技有限公司制造。本系统由水迷宫仪器: 圆形水池直径120cm，高50 cm，平台高度20cm，直径8cm，迷宫上方置有显示系统摄像机，计算机自动跟踪并记录游泳轨迹。XR-3TB 小鼠跳台测试箱自动记录系统，上海欣软信息科技有限公司制造。本系统装置为一被动回避反射箱，箱底铺以电栅作为刺激电极，箱内左后角置一个高度和直径均为 4.5 cm 的圆形平台为回避电击的平台区。