【摘要】 目的：研究阶段式大鼠脾阳虚证模型的复制方法及客观评价标准。方法：32 只 SPF 级雄性SD 大鼠随机分为对照组和脾阳虚证模型组（模型组），每组 16 只。模型组大鼠采用两段式造模方法；第1 阶段，即前 15 d 施加饮食不节和力竭游泳刺激；第 2 阶段，即后 7 d 每日早晚 2 次灌服番泻叶。为质控造模过程，以临床辨证要点为基础，建立了大鼠脾气虚和脾阳虚证的评价标准，并进行客观评价。结果：与对照组比较，模型组大鼠在第 1 阶段出现了消瘦、食少、神疲和乏力等症状，表明大鼠处于脾气虚状态；在第 2 阶段，上述变化更加严重，且有畏寒、便溏等症状，提示大鼠处于脾阳虚状态。结论：本研究中采用的两段式造模方法和模型评价标准，能够成功复制大鼠脾阳虚证模型。
【关键词】 脾阳虚； 脾气虚； 动物模型； 大鼠； 评价标准
脾阳虚证是中医证候研究的重要内容，其大鼠模型的复制方法有单因素法和复合因素法，因后者更好地模拟了该证的病因病机，目前应用较多，但还存在一些急需解决的问题。首先是模型的局限性问题。因为脾阳虚证的病因病机复杂，难以全面模拟，所以现有模型实为有限模型，并不具备脾阳气证的全部内涵，必须加以限定。其次是模型复制的质控问题。复合因素造模法多为两段式，即先复制脾气虚，再复制脾阳虚，而模型评价仅涉及脾阳虚，缺乏过程管理。为解决上述问题，本研究先后模拟脾气虚证和脾阳虚证的主要病因病机，并建立了阶段性评价标准以质控，成功复制了脾阳虚证的有限模型，特报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 32 只 SPF 级雄性 SD 大鼠，体质量（200±10）g，购于辽宁省本溪市实验动物中心 [SCXK（辽）-2010-0001]，随机分为对照组和脾阳虚证模型组（模型组），每组 16 只。大鼠饲养于辽宁中医药大学实验动物中心 [SYXK（辽）-2013-000-9]，室温 18~23 ℃，相对湿度 45%~55%，自由饮水进食，适应性饲养 1 周后，开始实验。
1.2 模型复制方法 第 1 阶段（phase 1， P1），按文献 [12] 方法复制脾气虚证模型（饮食失节＋劳倦型），即模型组大鼠在 15 d 内：（1）先饱食 1 d，再禁食 2 d，均不禁水，共 5 个循环；（2）每日水温35~37 ℃游泳至力竭。第 2 阶段（phase 2， P2），复制脾阳虚证模型（苦寒泻下型），即每日灌服 20% 番泻叶水浸剂（2 m L/100 g），早晚各 1 次，连续 7 d。
1.3 模型评价标准 以大鼠的生物学特征为基础，根据临床辨证要点，拟定脾气虚证的评价标准：消瘦，食少，神疲，乏力；脾阳虚证模型评价标准：前述标准加畏寒、便溏。
1.4 模型评价方法 分别在 P1、P2，每组取 8 只大鼠进行评价。
1.4.1 代谢水平评价 上午 9~10 时测量其体质量以评价消瘦；测肛温以评估畏寒；单只放入代谢笼24 h 后计算进食 / 水量，即投食 / 水量 - 剩余量，以评价食少；按文献 [12] 方法收集粪便，检测大便含水率，即（大便湿重 - 大便干重）/ 大便湿重×100%，观察便溏情况。
1.4.2 神疲评价 采用Supermaze动物行为学实验系统（上海欣软信息科技有限公司），按文献 方法进行检测，即将大鼠放入箱体中心，观察 5 min 内大鼠的运动距离和站立次数，彻底清洁箱体后，检测下一只大鼠。
1.4.3 乏力评价 采用 YLS-13A 大小鼠抓力测定仪（济南益延科技发展有限公司）检测前肢抓力。先用右手将大鼠按放在抓力板上，左手向前推抓力板，然后右手向后滑至鼠尾部，左手轻轻松开抓力板，待大鼠用力抓住抓力板时，及时加力后拉，以得到最大抓力。专人连续测量 3 次，取平均值。
1.5 统计学处理 采用 SPSS 17.0 统计学软件对数据进行分析，计量资料以（x-±s）表示，比较采用单因素方差分析，以 P<0.05 为差异有统计学意义。
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