hERG K+通道电流和药理学特性-Molecular Devices IonFlux（三）

2020.6.16

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

hERG 抑制剂的 IC50

获得全细胞模式后，hERG 电流可以持续记录超过60 分钟（最多120 分钟）（见图4 示例）。因而，在同一种细胞上两种不同加样方式均可以用来检测化合物的IC50 值。

每个试验区同一个细胞最多可以检测包含最多8 个化合物。图4 中显示的示例点线图展示了两种不同的量效实验模式。C1、C2、和C3 代表从低到高的三个不同浓度（在不同试验区中可以是相同或不同的浓度）。首先，C1、C2、C3 在依次累积加样方式下分别重复2 次给药，然后再按照每个浓度间隔外液冲洗后再给药的方式加样(Fig. 4)。顺序给药不同浓度后（依次累加或间隔冲洗）均导致了h E R G 电流在每个浓度产生相似的抑制率在本次实验中，两种不同的化合物（阿米替林和西沙比利，Amitriptyline 和Cisapride）被添加在记录板的不同试验区。其IC50 值来自于各自独立的细胞产生的量效曲线的拟合和计算。

多个已知得得hERG 抑制剂的IC50 值来自于图5 所示例电费Hill 方程的曲线拟合。其结果与文献报道的数据在表1 中进行了比较。

讨论

本实验成功验证了IonFlux平台在hERG钾电流研究和hERG通道抑制化合物筛选等方面的应用。多细胞的集合记录展现出了更高的成功率和电流更稳定的优势，特别在长时间持续记录时。hERG电流的激活和失活表现出了与手动膜片钳记录结果相似的电压依赖性特点。由于hERG电流的长时间记录（>60分钟）、化合物的快速加样和冲洗、以及加样过程中电压依赖性电流连续监控等特点，可以在一次实验中同样的细胞条件设置下得到多个化合的IC50值。IonFlux平台记录获得的IC50值与文献报道的结果是一致的(Redfern‘03;Guo&Guthrie‘05)。即使是疏水性的化合物也显示出了良好的与文献报道结果的一致性：TerfenadineIC50=25nM、Bepredil IC50=54nM 以及Astemizole IC50=15nM。

hERG 通道的药物效应高通量筛选在药物安全性实验中起到至关重要的作用。化合物高效数据的获取显示了IonFlux 在hERG 筛选和化合物特性分析方面是一值得拥有的高效工具。