志贺氏菌检测新国标厌氧条件增菌的分析

2012年5月17日，中华人民共和国卫生部颁布GB 4789.5-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验 志贺氏菌检验方法》，新国标将于2012年7月17日起实施。

该标准实施之日起，原GB/T4789.5-2003标准作废。  
 
解读新国标GB4789.5-2012

为了提高食品中志贺氏菌检出率，降低操作者的操作要求，增菌过程的调整是本次新标准最大的变动之处。
 
两份国标方法之间增菌部分的主要区别如下表所示：

更改增菌培养方式的最终目的是最大程度消除食物样品中的杂菌背景对于检测培养的影响。
 
1、厌氧环境41.5℃培养，可排除需氧菌和大部分不耐热的厌氧菌与兼性厌氧菌干扰；
2、使用志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素进行增菌，可排除革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性肠杆菌（如变形杆菌等）的干扰；
 
减少杂菌背景的同时，也降低了杂菌在增菌过程中对于数量很少的志贺氏菌的竞争抑制作用，可有效地提高志贺氏菌的扩增量，有助于进一步的分离与鉴定。

厌氧增菌的解决方案

不同于常规厌氧培养，新国标中的增菌培养是在无菌三角烧瓶或无菌匀质袋中进行，故厌氧袋因容积限制而无法使用，故我们推荐如下解决方案：

解决方案一：
每日样品检测量80-120份的实验室，建议配备AW500SG/TG全能型厌氧工作站。
 
型号           AW500SG/TG
最大培养容量： 120只（250ml标准三角烧瓶）
                         80 只（500ml标准三角烧瓶）
传输舱容量：     6只（250/500ml标准三角烧瓶）

解决方案二：
每日样品检测量70~90份的实验室，建议配备AW400SG/TG全能型厌氧工作站。
 
型号           AW400SG/TG
最大培养容量：  90只（250ml标准三角烧瓶）
                         70只（500ml标准三角烧瓶）
传输舱容量：      6只（250/500ml标准三角烧瓶）
 
解决方案三：
每日样品检测量60~70份的实验室，建议配备AW300SG通用型厌氧工作站。

型号           AW300SG
最大培养容量： 70只（250ml标准三角烧瓶）
                         60只（500ml标准三角烧瓶）
传输舱容量：     1只（250/500ml标准三角烧瓶）
（* 三角烧瓶底径需小于100mm,高度小于200mm）
 
解决方案四：
每日样品检测量30~50份的实验室，建议配备AW200SG迷你型厌氧工作站。

型号           AW200SG
最大培养容量： 50只（250ml标准三角烧瓶）
                         30只（500ml标准三角烧瓶）
传输舱容量：     1只（250/500ml标准三角烧瓶）
（* 三角烧瓶底径需小于100mm，高度小于200mm）
 
解决方案五：

每日样品检测量极少（≤5份）的实验室，建议配备large 、standard 或crystal厌氧罐，此方案需要将厌氧罐放入生化培养箱中培养。

型号           large 厌氧罐（不锈钢）
最大培养容量：  2只（250ml标准三角烧瓶）
                         1只（500ml标准三角烧瓶）
 
型号           standard 厌氧罐（不锈钢）
最大培养容量： 1只（250/500ml标准三角烧瓶）
 
型号           crystal 厌氧罐（透明，聚碳酸酯）
最大培养容量： 1只（250/500ml标准三角烧瓶）