1. 精制无细胞百日咳疫苗原液
   

将各项培养基成份预称好倒入tank内加水搅拌充分溶解后，将PH调至适当范围，121℃灭菌。将灭菌后之培养基分瓶、接种Bordetella pertussis （strain Tohama Phase I）菌35℃培养。收集菌液（须进行pH、HA、FHA测试），用硫酸氨（Ammonium sulfate）沉淀，用高浓度盐抽出，经蔗糖梯度离心分离纯化2次，第1次分离后进行HA测试、蛋白质含量测试、免疫沉淀（FHA、PT），第2次分离后除上述三项测试外，加测LAL试验。再加福尔马林于35℃、5周不灭活处理后作为batch原液（须进行蛋白氮含量试验、染色试验、无菌试验、灭活试验、易热性毒素否定试验、小鼠体重减少试验、小鼠白血球数增加试验、Histamine增感试验、热原试验）。

2.白喉类毒素原液

将白喉杆菌接种于Loeffer Medium（斜面培养基），移种一次于Loeffer Medium，再移植至液体培养基振荡培养，然后用培养基增值、振荡培养、接着大量接种培养于6支20公斤瓶中，其培养基在接种前加入无菌过滤之maltose。收集培养液，须进行染色试验（确认无杂菌）及毒素力价Lf测定（此时约250Lf/Ml）。离心除菌，将毒素液无菌过滤、超滤（MW30,000）、用硫酸氨（Ammonium sulfate）沉淀、回收、限外超滤（MW100,000），再加福尔马林于33-35℃、4-6周灭活处理（此时约500Lf/mL，须进行豚鼠及兔子之无毒化试验）精制。过滤后作为batch原液（须进行纯度试验、内毒素含量试验、完全性试验、Lf测定、无菌试验、无毒化试验（豚鼠及兔子）、小鼠体重减少试验、白喉类毒素交叉否定试验）。

3.破伤风类毒素原液

将破伤风梭菌接种于培养基在35℃培养7天，收集培养液（须进行无菌试验、染色试验，确定无杂菌）、过滤（须进行Lf测定pH测定），过滤后膜作完整性试验。限外过滤、用硫酸氨（Ammonium sulfate）沉淀精制、离心、通胶质colum分离（分子量分离）过滤，此时须进行毒素力价Lf测定（约1,500~~2,000Lf/mL）。再加福马林于35℃、5周灭活处理，作为破伤风类毒素原液（须进行纯度试验、Lf测定、蛋白氮含量试验、无菌试验、灭活试验、小鼠体重减少试验、破伤风类毒素交叉否定试验）。

4.中间原液

将精制百日咳疫苗原液、白喉类毒素原液、破伤风类毒素原液混合，以铝凝胶吸附，作为中间原液。此时须进行pH试验、铝含量试验、硫柳苯含量试验、甲醛含量测验、蛋白氮含量试验、无菌试验、异常毒性试验、小鼠体重减少试验。

5.最终原液

将中间原液稀释，作成最终原液。

6.小分制品

将最终原液分装充填而成，此时须进行pH试验、铝含量试验、硫柳苯含量试验、甲醛含量测验、无菌试验、异常毒性试验、小鼠体重减少试验、小鼠白血球数增加试验、Histamine增感试验、白喉类毒素无毒化试验、破伤风类毒素无毒化试验、效价试验（吸附精制百日咳疫苗、吸附白喉类毒素、吸附破伤风类毒素）、蛋白氮含量试验

7.国家鉴定