流感疫苗生产的纯化过程和设备

流感疫苗生产的纯化过程：

1.       已培养好的带病毒的鸡胚用75％酒精消毒；

2.       收集鸡胚尿囊液：根据鸡蛋大小收集量略有不同（每只6－10ml）；

3.       尿囊液初滤JST型10μm滤芯过滤；

4.       连续流离心机或超滤系统过滤

a.  连续流离心机：日立R13C，用12,000rpm，流量：每分钟600－800ml，除去杂质，上清液用于透析浓缩；

b.  Millipore超滤系统，0.45μm滤膜，除去杂质

5.       尿囊液的透析浓缩：用Millipore超滤器，1000KD膜包浓缩，浓缩后通常为尿囊液量的1/30；

6.       超速离心的病毒纯化（略）；

7.       福尔马林脱毒；

8.       乙醚裂解；

9.       100KD透析脱糖；

10.   去福尔马林；

11.   去乙醚……

12.   几种流行病毒抗原的混合（如H1N1+H3N2+H2N2）和稀释

13.   加入稳定剂

14.   成品

离心纯化需要准备的仪器和基本材料：

1.       仪器

a.  阿贝折射仪 Abbe  refractometer （测蔗糖浓度）

b.  Cole parmer 软管泵：KH-77913-25

c.  紫外分光光度计或核酸蛋白分析仪（有280nm，260nm波长的），可以是带流动池及记  录仪，也可以是带标准样品池的）

2.       梯度液

a.        PB缓冲液PH7.3

b.       30％ w/w蔗糖液（Sucrose，Sigma，AR级）

c.        55％ w/w蔗糖液

d.       58％ w/w蔗糖液

3.       实验器具

a.        50ml有刻度玻璃管    100支

b.       500ml有刻度烧杯     5支

c.        100ml有刻度烧杯     5支

d.       1000ml有刻度量筒    3只