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R&D Systems试剂 Q&A 常见问题解答(三)

2020.7.14
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

ELISA

酶联吸附免疫法

 

问:人的Quantikine ELISA试剂盒是否有相关的对照?

答:R&D Systems为人的Quantikine ELISA试剂盒提供三重对照组。请同我们联系以便确定产品的目录号。

问:我想使用你们目录中的重组蛋白作为我的ELISA的对照,但我发现质量上有差异。这是为什么?

答:首先要考虑的是重组蛋白的质量会高出试剂盒的可测试范围数倍,必须将重组蛋白稀释多次才能得到试剂盒的测试范围。一般来说是从mg/毫升稀释到pg/毫升,在这中间光是移液管的误差就达到了可测量的水平。

其次要考虑的是R&D Systems的免疫测试方法测量的蛋白水平是用一种抗体捕获的、用第二种抗体测定的,这种测定是在试剂盒研发时与标准蛋白校正过的。这些经过测定的早期标准蛋白成为基本校正物,后来的标准都同它校正。这样不同生产批号的免疫测定试剂盒将是一致的。这些基本校正物蛋白质量的测量方法也许与你的试剂管中蛋白质量的测定方法有所不同。

问:什么是竞争性ELISA?

答:竞争ELISA基于竞争结合技术,即样本中的待测分子与固定量的标记的同样分子(我们一般用碱性磷酸酶作为标记)同时与固定在孔板上的抗体的同一结合位点进行竞争,参照标准曲线,试验数据值是定量的。

问:什么是夹心ELISA

答:夹层ELISA采用对样本中分析物的特异的抗体作为固定化的捕获抗体,然后用第二个带标记的抗体作检测,检测抗体对分析物也是专一的。当参照标准曲线时,试验数据值是定量的。

问:什么是直接ELISA

答:直接ELISA是将被测的分析物直接包膜在微孔板表面,然后用测试抗体来证实被测分析物的存在。当与重组蛋白(标准曲线)进行参照时,试验数据值是半定量的。

问:R&D Systems Parameter品牌的ELISA试剂盒可以做多少个样本?

答:R&D Systems Parameter品牌的ELISA试剂盒可以做6点的标准曲线、对照和41个样本(每个样本做双份)。

问:R&D SystemsQuantikine品牌人的ELISA试剂盒可以做多少个样本?

答:大多数R&D Systems 的Quantikine品牌人的ELISA试剂盒可以做标准曲线、对照和40个样本(每个样本做双份)。

问:R&D SystemsQuantikine品牌的小鼠、大鼠和猪的ELISA试剂盒可以做多少个样本?

答:Quantikine品牌的小鼠或大鼠的ELISA试剂盒中的每一微孔板可以做标准曲线、对照和39个样本(每个样本做双份)。Quantikine品牌的小鼠或大鼠的ELISA试剂盒中,有些有两个微孔板,有些只有一个微孔板。

问:R&D Systems建议用什么样的ELISA微孔板来做DuoSets和抗体配对实验?

答:在R&D Systems本部,我们用Costar的微孔板(目录#2592)。Costar的电话是(800)492-1110。

问:R&D Systems用什么纯度的BSAELISA

答:为了ELISA,我们采用Serological Proteins的BSA(目录#82-045)。Serological Proteins的电话是(815)937-8270。

问:Quantikine ELISA试剂盒里都包括什么?

答:R&D Systems的Quantikine ELISA试剂盒是一个完整的试剂盒。它包含了一个已包板的微孔板、酶标抗体、标准蛋白、稀释剂、底物、终止剂、洗液和微孔板密封膜。所有试剂盒对实验说明书中所列样本都经充分验证,确保高质量。

问:什么是DuoSet

答:DuoSet ELISA开发系统提供了足够的捕获抗体、测试抗体、标准蛋白和Streptavidin-HRP,可以做大约十五个96孔微孔板的实验。我们还提供了样本试验流程和与这一系统配套的试剂。DuoSet ELISA开发系统主要是为高通量筛选细胞培养的上清液所设计,但熟悉ELISA研发的实验人员已成功将其推广到血清和血浆样本的使用。

问:什么是R&D Systems的抗体配对?

答:R&D Systems的抗体配对是一个自己动手的产品。R&D Systems建议此产品的使用者在免疫测试的开发方面应很有造诣。使用者必须以经验为依据来决定捕获抗体和测试抗体的最佳浓度。R&D Systems的重组细胞因子并未经ELISA校正,所以在使用前必须经ELISA做质量校正。更多有关ELISA开发的信息可参照我们的《ELISA开发指导》 (网站: http://www.rndsystems.com/tsg_detail_objectname_elisa_development.aspx) 。

问:QuantikineQuantiGlo ELISA试剂盒有何不同?

答:R&D Systems的Quantikine牌子的ELISA试剂盒是一种比色法检测,需要一台标准读光仪配备有合适的滤光片可用于读数和光波长校正。QuantiGlo ELISA试剂盒采用了一种荧光底物,计数为光流明或相对光单位(RLU)。因此,QuantiGlo ELISA试剂盒需要有荧光读光仪。这种荧光读光仪需设置在:1.0分钟的滞待时间;1.0秒/孔的读数时间;累计状态;自动获取开启。R&D Systems使用Dynex Technologies的荧光读光仪。


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