问：普通Quantikine ELISA试剂盒同高灵敏Quantikine ELISA试剂盒有何不同？
答：高灵敏Quantikine ELISA试剂盒一般用于非常低量的细胞因子的检测，比如正常人（健康状态时）的血清和血浆。当普通Quantikine试剂盒一般检测不到（或几乎检测不到）正常人血清和血浆中的细胞因子，可选择高灵敏Quantikine。我们建议实验者先查阅文献资料来确定试验的测试范围以选择所需的试剂盒的种类。
问：R&D Systems的Quantikine试剂盒是否可用于组织匀浆（或其它未经检验的）样本？
答：很遗憾，R&D Systems尚未采用组织匀浆作为样本对Quantikine系列的试剂盒做效果验证。如果要决定试剂盒是否可用于未经检定的样本，实验者最好先做一个“掺入和回收预试验”。简单来说，实验者将样本分为两份：一份中掺入一定量的试剂标准，然后做一稀释系列（一般稀释到1:16），再将掺入过的一份同未掺入的一份相比。采用以下的公式来计算回收率（%）：测试值（pg /毫升）/ 期待值（pg /毫升）x 100% = % 回收率。一般来说，回收率在80-120%可认为是可接受的。但是，可接受范围应由每一实验室自行决定。这种方法可用于检定未被R&D Systems检定的任何样本。我们还有更加详细的“掺入和回收”的实验步骤，可向我们的技术服务部索取。我们也可进一步查阅文献看一看是否有其他试验人员用我们的产品做过不同的样本，或不同的属种。
问：加入稀释剂是否会将样本进一步稀释？
答：因为稀释剂是加入到所有的孔中，标准和被测样本都被同样稀释，所以样本的浓度可从标准曲线读出，而不需作稀释调整。
问：我是否可将标准曲线的两端延伸？
答：在任何情况下，我们都不支持超出确定范围的实验结果。在我们确定的测试范围，我们保证实验结果的可重复性。
问：为什么不将测试范围延伸到所述的灵敏度？
答：灵敏度是统计中大于零的可测到的最低值。它是通过本底信号和试验的可变性计算出来的。灵敏度是将20个零复制物的中值加两个标准差从标准曲线换算成分析物的浓度。而最低标准是我们可以放心的、仍可与标准曲线成直线相关的最低点，因而是可定量的。
问：Quantikine试剂盒中的试剂是否可互换？
答：如果试剂盒(RD1-, RD5-, RD6-)中的稀释剂有相同的组件号和批量号，它们可以互换。R&D Systems做“整个试剂盒的质量控制”，就是说，我们不支持不同批号之间的替代。在任何情况下，微孔板和共轭物都不可互换。
问：Quantikine试剂盒中的洗液是否可互换？
答：如果组件号相同，洗液在相同类型的试剂盒之间（普通试剂盒之间，或高灵敏度试剂盒之间）是可以互换的。但是，普通Quantikine试剂盒中的洗液不能用于高灵敏度的试剂盒，在普通Quantikine试剂盒中的洗液含有磷酸，会干扰高灵敏度Quantikine试剂盒中由NADPH驱动的信号扩增。
问：在某些实验中为什么必须使用聚丙烯（polypropylene）的试管做标准稀释？
答：有些细胞分子会粘到玻璃或聚苯乙烯（polystyrene），但不粘聚丙烯。
问：在Quantkine试剂盒中没有足够的RD5校正物来稀释我的细胞上清液，我该怎么办？
答：你可用细胞培养液来做起始的稀释，直接移液到微孔板的最终的1:10稀释可使用校正物来稀释。
问：我的Quantikine试剂盒中的RD1测试稀释剂看上去有沉淀物，可以用吗？
答：有些RD1测试稀释剂的确有不同程度的沉淀物。在这种情况下，我们在实验步骤手册中已做纪录。
问：标准曲线为什么要采用4-pl拟合？
答：R&D Systems在研发和质控我们绝大多数的Quantikine ELISA试剂盒时，采用4-相参数的曲线拟合（又名为4-pl或sigmoidal曲线拟合）。一般来说，它比log-log和直线有更好的曲线拟合。如果数据分析不可用4-pl的话，log-log是下一个最好的选择。
问：试验步骤中说要用500 rpm，我的摇床达不到。这个速度是正确的吗？
答：500 rpm使用的是0.12英寸的震荡轨道。如果你的震荡器用更大的震荡轨道，500 rpm的确是过快了。在这种情况下，你应根据R&D Systems的建议重新调整震荡速度。你可拿一个多余的96孔微孔板，加入洗液，洗液的量与实验时孔中的溶液量一致；封板后，调整震荡器的速度，直到液体在孔的上部剧烈旋转但不溅到封膜上或产生泡沫为止。
问：我有太大变异系数（CV）的问题，是怎么回事？
答：最大但不是唯一的两个原因，可能是移液误差和清洗方式。你可参照我们的《如何成功地操作ELISA指导》，网址：http://www.rndsystems.com/tsg_detail_objectname_elisa.aspx
问：Quantikine ELISA试剂为什么需要做稀释？
答：主要有两个原因：一，在绝大多数的样本中细胞因子的含量非常高，如不经稀释，读数将高于标准曲线；二，也是最普遍的原因我们建议做稀释，是将样本中的干扰或基质效应稀释掉。
问：我是否可以在任何过夜步骤停止Quantikine试验、延长温育时间、或提高温育的温度？
答：R&D System不建议对任何Quantikine ELISA延长温育时间。而且，当实验步骤改变了，我们无法保证Quantikine ELISA的实验结果。R&D System做“整个试剂盒的质量控制”，就是说我们无法支持改变过的实验步骤，因为它们未经质量控制。延长温育时间、或提高温育温度以缩短温育时间会提高实验的本底（又名空白或零标准）。这样一来，样本和标准中的低量细胞因子会测不到，因为增高了的本底信号将从所有孔中的数值中差减。
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