A.过夜培养物转种后27拚2度快摇约205hrs至O.D 值为0.3 左右。
B.取1ml菌液离心收菌,加入0.1ml 冰浴的1 ′TSS 液轻轻吸打悬起细胞。(可以放-70 摄氏度冻存半年)B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 ′TSS 混匀,该方法只适于做质粒转化,如做连接产物转化请按2A做。
C.加100pg-10ngDNA 混匀。冰浴10min ,室温放置10分钟再次冰浴10mins.
D.加1ml LB,37摄氏度1 小时。
E.涂板。转化效率106-108 对于DH52,C600 ,等转化效率在107-108 以上)。 快速鉴定插入外源片段的克隆