试剂、试剂盒 Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸
仪器、耗材 荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱
实验步骤
1. 用水按1：500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中，置室温2 min。
2. 室温下，在水中洗2 min，晾干。
3. 在42℃至55℃烘箱中，烘烤玻片30~60 min，取出置室温。
4. 用0.5 g/ml 加拿大香柏油为介质，加上盖玻片，将玻片置室温干燥2天。
5. 用Hoechst 落射荧光镜头观察细胞核，用红色滤光片盖住光源并同时以暗视场观察银粒。银粒将显示红色且与显示蓝色荧光的细胞核形成鲜明对比。如欲照像，可对细胞核和银色的颗粒进行二次曝光。
注意事项
1. 勿用Permaunt，因在观察细胞核时会出现自发突光，加拿大香柏油能很好地显现石蜡切片并在紫外照射下不发荧光，Gelvatol 可用于冰冻切片，但不应用于石蜡切片，因其不能显现组织成分。
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