实验方法原理
实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)
试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA
仪器、耗材 T25培养瓶
实验步骤
(a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。
(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分离步骤。
(c)用起始培养基按5×106〜7×106个细胞/mL浓度接种到T25的培养瓶中。
(d)将细胞在37℃，5% CO2的条件下培养，2〜4周内每周一次更换培养基和细胞因子。
(e)形成USSC集落后，在扩增培养基中扩增细胞。
(f)将细胞在37℃,5% CO2的条件下培养。
(g)到达80%汇合后，用0.05%胰蛋白酶/EDTA消化细胞，并按1:3比例传代，在相同培养条件下继续培养。
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