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核酸染色实验

2020.8.18
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。

实验材料 石蜡组织切片

试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色液浓盐酸蒸馏水二甲苯无水乙醇中性树胶

仪器、耗材 滴管


实验步骤

Schiff 试剂染色液(见糖原部分)。


5mol/L 盐酸液:浓盐酸(相对密度 1.19)42 ml,蒸馏水加至 100 ml。


1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


2. 蒸馏水洗 2 min,5mol/L 盐酸液中水解 30 min。


3. 蒸馏水洗 3 次,浸入 Schiff 染色液中 30 min。


4. 直接浸入自来水中 5 min。


5. 根据需要进行对比染色。


6. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。


注意事项

1. Schiff 试剂每次使用时,要注意吸管淸洁,试剂用后应及时存放冰箱。

2. 对比染色剂可选用亮绿或苯胺蓝,根据需要进行淡染色。

其他

结果:DNA 呈紫红色,其他是对比染色。


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