微孔滤膜过滤除菌实验

实验方法原理 微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盖盒組成，出口处可连接针头，入口处可连接针筒，使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间，旋紧盖盒，当溶液从针筒注入滤器时，此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面，从而达到除菌的目的。根据待除菌溶液量的多少，可选用不同大小的滤器。

实验材料 肉汤蛋白胨平板

试剂、试剂盒 2% 的葡萄糖溶液

仪器、耗材 注射器微孔滤膜过滤器0.22μm 滤膜无菌试管镊子玻璃刮棒

实验步骤

1. 组装、灭菌

将 0.22 μm 孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中，旋紧压平，包装灭菌后待用（0.1 MPa， 121.5℃ 灭菌 20 min）。

2. 连接

将灭菌滤器的入口在无菌条件下，以无菌操作方式连接于装有待滤溶液（2% 葡萄糖溶液）的注射器上，将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中，见图 VI-5。

3. 压滤

将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中，滤毕，将针头拔出。

4. 无菌检査

无菌操作吸取除菌滤液 0.1 ml 于肉汤蛋白胨平板上，涂布均匀，置 37℃ 温室中培养 24 h，检査是否有菌生长。

5. 清洗

弃去塑料滤器上的微孔滤膜，将塑料滤器清洗干净，并换上一张新的微孔滤膜，组装包扎，再经灭菌后使用。

注意事项

1. 压滤时，用力要适当，不可太猛太快，以免细菌被挤压通过滤膜。

2. 整个过程应在无菌条件下严格无菌操作，以防污染。过滤时应避免备连接处出现渗透现象。