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蓝藻门、裸藻门、黄藻门、硅藻门鉴定

2020.8.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理 
实验材料 色球藻属念珠藻属颤藻属藻类
试剂、试剂盒 I-KI 溶液0.1%甲基蓝溶液浓KOH溶液
仪器、耗材 显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸
实验步骤 
蓝藻是最原始最古老的光合自养原植体植物。细胞无核膜、核仁及其他细胞器,在细胞中央具有核物质,属于原核生物。蓝藻植物体多为蓝绿色,含叶绿素 a 、藻蓝素,贮藏蓝藻淀粉。广泛分布于淡水及潮湿的土壤、树皮、墙面及岩石表面。

1 颤藻属 Oscillatoria


隶属于颤藻目,颤藻科。广布于污水沟和湿地上,一年四季均可采到。温暖季节生长旺盛,常在浅水底或地面形成蓝绿色黏滑的膜状物或成闭漂浮水面。为得到纯净的实验材料,可提前一天将采到的材料置于装有清水的小烧杯中,颤藻可借滑行、摆动移动到水面以上的烧杯壁上。实验时用摄子或解剖针挑取烧杯壁上少量的蓝绿色颤藻,置于载玻片中央的水滴中制成临时装片,在显微镜下进行观察:


(1)藻体的形态和运动


颤藻是单列细胞组成的不分枝的丝状体,丝状体能前后移动和左右摆动。注意观察丝状体细胞的形状(常宽大于长)、滑行和摆动的方式以及藻体外是否有胶质鞘。


(2) 细胞结构和贮藏物质


先在低倍镜下选择较宽、细胞较长的丝状体,然后换高倍镜仔细观察丝状体细胞的界限。其藻丝是由单列细胞所组成,无异形胞,注意两端的细胞形态有何特点。调节细准焦旋钮,观察细胞壁内侧呈蓝绿色的周质和细胞中央颜色较浅的中央质。用 0.1%亚甲基蓝染色 1-2min 后,中央质可染成深蓝色易与周质分开。蓝藻的贮载产物主要是蓝藻淀粉,呈微小颗粒分布于周质中。用 I-KI 溶液染色,可将它染成红褐色。蓝藻的储藏物还有蓝藻颗粒体,多为分布在细胞横壁附近的大小不等的颗粒。周质中还有一些小黑点,是气泡(假液泡)。


(3) 藻殖段的观察


藻殖段是颤藻的主要营养繁殖方式。颤藻的丝状体上的死细胞或隔离盘,将丝状体分成一个个片段,即为藻殖段。先在低倍镜下镜检载玻片,当发现丝状体中有发亮的细胞,再高倍镜观察,即可看清双凹形的死细胞。再仔细寻找丝状体上有无胶质的隔离盘,注意比较死细胞和隔离盘的区别。


2. 念珠藻属 Nostoc


隶属于颤藻目,念珠藻科。该属藻类常生于水中、潮湿土壤或石面上,是种不同大小的胶质球或木耳状的胶质片,属固氮蓝藻。供食用的地木耳和发菜都隶属于该属,,地木耳生于山溪边潮湿的土壤上,夏季雨后较易采到,为不规则的胶质片或胶团;发菜则为名贵干菜,群体外观为头发状的胶质丝。取少量新鲜或事先泡好的地木耳(或发菜)置于载玻片中央,加一滴水,先用镊子或解剖针将胶质小块适当捣碎,然后盖上盖玻片,并用于指轻压盖玻片使材料均匀散开,制作成压片,即可在显微镜下观察。


(1)藻体的形态


藻体是由一列细胞组成的不分枝的丝状体,无规则地集合在一个公共的胶质鞘中。


(2)藻体细胞结构


高倍镜下可以吞到丝状体由圆形细胞组成。仔细观察可见丝状体中还有两种不同的细胞,一种是色浅,内含物均匀透明的异形胞,注意异形胞与营养细胞相连接处可看到发亮的折光性强的节球,它是相接处的内壁加厚形成;另一种是连续几个较大的椭圆形厚壁细胞,其内含物变稠,颜色鞘深,为厚壁孢子。比较营养细胞、异形胞和厚壁孢子之间的不同,并考虑异形胞在念珠藻的繁殖及固氮方面的作用。


3 蓝藻门其他常见种类:


(1)角腥藻属 Anabaena


多生于池塘、沟渠或有机质丰富的湖泊水库中,也为固氮蓝藻。用吸管取一滴含有鱼腥藻的标本制成临时装片,然后在显微镜下观察,注意每条丝的三种类型细胞(营养细胞、异形胞和厚壁孢子),并和念珠藻属进行比较,二者有何相同之处?又有何明显区别?


(2)螺旋藻属 Spirulina


多数种为多个细胞连接的丝状群体,少为单细胞,但两者的形态均为规则的螺旋状体。实验材料以极大螺旋藻和钝顶螺旋藻 (具横壁多胞)为佳,因二者个体较大。吸取一滴培养藻液作临时装片(或永久制片),在显微镜下注意观察其形态、颜色和运动方式,注意群体细胞界限。


(3) 色球藻属 Chroococcus (图 2-18-2)

隶属于色球藻目,色球藻科。色球藻属的种类常在池塘、水沟中营浮游生活,也常生长在潮湿的地面、树干或花盆壁上。用吸管滴一滴标本液于载玻片的中央,盖上盖玻片,先于低倍镜下观察,然后再转至高倍镜下观察。色球澡是单细胞或数个细胞组成的群体,注意单细胞和群体状态下细胞的形状。它们的细胞外面都有厚的胶质鞘。调节细准焦旋钮,观察在细胞中央颜色较淡的部位为中央质,周围颜色较深的部分为色素质。用 0.1%亚甲基蓝染色 1-2min 中央质可被染成深蓝色,观察效果较好。


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