[附2]二苯胺显色法测定DNA含量
原理
脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400
g范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。除DNA外，脱氧木糖、阿拉伯糖也有同样反应。其他多数糖类，包括核糖在内，一般无此反应。
操作方法
一、DNA标准曲线的制定
取10支试管，分成2组，依次加入0.4、0.8、1.2、1.6和
2.0mLDNA标准溶液。添加蒸馏水，使之都成2mL。另取2支试管，各加2mL蒸馏水作为对照。然后各加入4mL二苯胺试剂，摇匀。于60℃恒温水浴中保温1小时，冷却后于595nm处进行比色测定。取两管平均值，以DNA浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。
二、制品的测定
取 2支试管，各加2mL待测液（内含 DNA应在标准曲线的可测范围之内）和4mL二苯胺试剂，摇匀。其余操作同标准曲线的制作。
三、DNA含量的计算
根据测得的光吸收值，从标准曲线上查出相当该光吸收值DNA的含量，按下式计算出制品中DNA的百分含量：
试剂和器材
试剂
1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度)：取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 g/mL的溶液。
2.样品待测液：准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 g/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时，要求RNA制品的每mL待测液中至少含有20 g DNA，才能进行测定。
3.二苯胺试剂：使用前称取1g重结晶二苯胺，溶于100mL分析纯的冰乙酸中，再加入10mL过氯酸（60%以上），混匀待用。临用前加入1mL1.6%乙醛溶液。所配得试剂应为无色。
器材
1.分析天平 2.恒温水浴 3.试管 4.吸量管（2mL和5mL） 5.分光光度计
[附3]地衣酚显色法测定RNA含量
原理
核糖核酸与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变为糠醛，后者与3，5-二羟基甲苯（地衣酚）反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁或氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20～250
g范围内，光吸收与RNA的浓度成正比。地衣酚反应特异性较差，凡戊糖均有此反应，DNA和其他杂质也能给出类似的颜色。因此测定RNA时可先测定DNA
含量，再计算出RNA含量 。
操作方法
一、RNA标准曲线的制定
取10支试管，分成2组，依次加入0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mLRNA标准溶液。分别加入蒸馏水使最终体积为2.5mL。另取2支试管，各加入2.5mL水作为对照。然后各加入2.5mL地衣酚试剂。混匀后，于沸水浴内加热20分钟。取出冷却（自来水中）。于670nm波长处测定光吸收值。取两管平均值，以RNA浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标作图，绘制标准曲线。
二、制品的测定
取2支试管，各加入2.5mL待测液，（样品量应在标准曲线的可测范围之内），再加2.5mL地衣酚试剂。如前所述进行测定。
三、 RNA含量的计算
根据测得的光吸收值，从标准曲线上查出相当该光吸收值的RNA含量。按下式计算出制品中RNA的百分含量：
试剂和器材
试剂
1.RNA标准溶液（须经定磷确定其纯度）：取酵母RNA配成200 g/mL的溶液。
2.样品待测液：准确稀释，使每mL溶液含RNA干燥制品50-100 g。
3.地衣酚试剂：先配制0.1%三氯化铁的浓盐酸（分析纯）溶液，实验前用此溶液作为溶剂配成 0.1%地衣酚溶液。
器材
1.分析天平 2.沸水浴 3.试管 4.吸量管 5.分光光度计
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