4、Loading buffer（10ul每个样）
| 总体积 | 100ul | 200 ul | 500ul |
| 10×MOPS | 10ul | 20 ul | 50ul |
| 甲醛 | 16 ul | 32 ul | 80 ul |
| 甲酰胺 | 50ul | 100 ul | 250ul |
| Dye | 20 ul | 40 ul | 100 ul |
| DEPC H2O | 4 ul | 8 ul | 20 ul |
注： 不加EB
5、样品准备
将样品保持在冰块中。
5ugRNA+ 10ul loading buffer
3等份分装 Eppendorf doff 中 （1） 检测 （2）28s 或者Actin （3）有用的RNA
变性：65度，10分钟，然后将样品放到冰块中。
Prepare letter：： 1-2ul letter+10 ul loading buffer
Loading 样品
小心将样品转移到泳道中，吸管头部不能有气泡
电压：90-120V，1小时。
四、Blotting （transfer）
将电泳胶剪切下来检测RNA。
（1）检测RNA：在胶中加入EB染色。
（2）28S和有用的RNA：
加 0.05N NaOH，20分钟。
DEPC H2O清洗 2-3分钟。
20×SSC 浸泡20分钟。
准备尼龙膜3张和滤纸
转膜：从底部开始
塑料薄膜
滤纸：大小可以盖住20×SSC
胶： 正面向下，以便RNA可以贴着膜，在胶的周围用电影胶片围着。
尼龙膜：一旦用了，就不能够移动了。
滤纸三层：与胶的大小一致。
纸巾：5-8厘米厚。
将上述物品固定后，在上面压一块重物，过夜（或者至少要8小时）
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