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肠炎造模:DSS在诱导非啮齿类动物肠炎模型的作用-2

2021.3.01
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身


 

2. 果蝇—Drosophila

背景介绍 

在生长,衰老及病原体攻击过程中,干细胞分化对于组织的完整是至关重要的。成人胃肠道会受到各种刺激,而已修复的组织再生会造成炎症疾病和癌症。研究人员发现成年果蝇中存在结肠干细胞,表明在中肠中充满了各种类型的细胞。然而,还不明确这些结肠干细胞是否对环境变化发生应答。通过给果蝇喂食 DSS(MP Biomedicals)和博来霉素,以及表达凋亡蛋白,发现果蝇结肠干细胞的分化增加以响应组织损伤。

 

实验概述

实验目的:通过给果蝇喂食 DSS,造成组织损伤,研究结肠干细胞是否应答。

实验动物:3-5 日龄果蝇。

实验材料:DSS(36K-50KDa,MP Biomedicals),Dextran(MP Biomedicals)。

 

实验步骤

1. 用 5% 的蔗糖溶液分别配制含有不同成分的喂食培养基,类别包括各含 1%,3% 和 5% 的 DSS,3% 肝素,3%dextran,25 μg/ml 博来霉素;

2. 预先用 500μl 的喂食培养基将 2.5 cm×3.75 cm 的层析纸润湿,然后放入空的培养瓶中;

3. 将果蝇放入含有层析纸的瓶中,29℃ 培养两天,期间每天将存活的果蝇移入含有新鲜培养基的空瓶中。

 

实验结论

1. 喂食 DSS 造成的致死率有剂量依赖性。
2. 与其它化学试剂相比,平均分子量为 40KDa 的 DSS 更为有效,作用是高度重现的。

案例文献:Amcheslavsky, A., Jiang, J. & Ip, Y.T., 2009. Tissue damage-induced intestinal stem cell division in Drosophila. Cell stem cell, 4(1), pp.49–61.

 

3. 兔—Rabbit

背景介绍

在炎症性肠病治疗中,猪鞭毛虫卵是一种非常有前景的治疗方式。由于猪鞭毛虫卵不能寄生在啮齿类动物中,所以无法在小鼠和大鼠中研究猪鞭毛虫卵治疗的作用机理,但是猪鞭毛虫卵能寄生在人和兔体内。因此,有必要建立炎症性肠病的兔模型,以研究猪鞭毛虫卵在体内的治疗方法。

 

实验概述

实验目的:用 DSS 进行化学诱导,构建急性肠炎兔模型。

实验动物:雌性白色喜马拉雅兔,体重 1.9-2.1 kg。实验组 12 只,对照组 5 只。

实验材料:DSS(36K-50K Da,MP Biomedicals)。

 

实验步骤

1. 在兔运抵实验室后,日常饲养至少四天。喂食 DSS 前一周,将饮用水换成有机茴香茶;

2. 将 DSS 溶解在冷的有机茴香茶中,浓度为 0.1%(w/v)。饮料须新鲜配制,至少每两天更换一次,饮用 5 天;

3. 每天监控体重,饮食,饮入量,粪便形状,外形变化,进行 DAI 评分,周期为 14 天。

 

实验结论

1. 饮用含 DSS 的饮料第四天,饮用量,饲料食用量,体重开始出现下降。

 

2. 肠道的组织学评估表明:炎症位于盲肠的病理学特征,而肠道的其它区域没有显示出组织损伤。

案例文献:Leonardi I, Nicholls F, Atrott K, Cee A, Tewes B, Greinwald R, Rogler G, Frey-Wagner I. Oral administration of dextran sodium sulphateinduces a caecum-localized colitis in rabbits. Int J Exp Pathol. 2015 Jun;96(3):151-62.

 



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