DNA结合染料对细胞核的多色标记技术的多种应用

DNA结合染料对细胞核的多色标记技术
 

细胞核是动物细胞器中最大的。在哺乳动物细胞中，核的平均直径约为6μm，约占总细胞体积的10％。核包含细胞的大部分遗传物质，组织成多个长线性DNA分子，与多种蛋白质（例如组蛋白）复合形成染色体。这些染色体内的基因是细胞的核基因组。核的功能是维持这些基因的完整性，并通过调节基因表达来控制细胞的活性，因此，核是细胞的控制中心。组成核的主要结构是核被膜，它包围整个细胞器并从细胞质中分离出其内含物的双膜和核骨架。

标记活细胞核

核绿 LCS1，核橙 LCS1，核红 LCS1和核黄（Hoechst S769121）是DNA选择性和细胞渗透染料，用于分析活细胞中的DNA含量。与DNA结合后，这些染料的荧光明显增强。它们可用于荧光成像，酶标仪和流式细胞仪应用。这些具有DNA结合力的染料可用于带有适当滤波片组的活细胞的多色分析。
 

我们最新研发的核紫 LCS1是一种发荧光的，DNA选择性和细胞渗透性染料，用于分析活细胞中的DNA含量。当与DNA结合后，核紫 LCS1的蓝色荧光明显增强。它可用于荧光成像，酶标仪和流式细胞仪应用。它被405 nm的紫外激光很好地激发，并发出蓝/蓝绿色荧光，最大发射波长约为440 nm，为配备405 nm紫激光源的流式细胞仪提供了出色的染料。该DNA结合染料可通过Pacific Blue 和BD Horizon V450滤波片组用于活细胞的多色分析。
 

图1.活体HeLa细胞图像被Nuclear Green LCS1染色。用红色荧光Cell Navigator 线粒体染色试剂盒对活HeLa细胞的线粒体进行染色。

标记死细胞核

核绿 DCS1，核橙 DCS1和核红 DCS1是DNA选择性和细胞不渗透染料，用于分析死细胞，固定细胞或凋亡细胞中的DNA含量。与DNA结合后，DCS1染料的荧光明显增强。它们可用于荧光成像，酶标仪和流式细胞仪应用。这些具有DNA结合力的染料可用于具有适当滤波片组的死亡、固定或凋亡细胞的多色分析。

图2.使用Apopxin 深红色染料在Jurkat细胞中检测磷脂酰丝氨酸的活性。 荧光图像：活细胞（蓝色）被CytoCalcein Violet 450染色，凋亡细胞（红色）被Apopxin 深红色染色，坏死细胞（绿色）被Nuclear Green DCS1染色。 使用1μM星形孢菌素诱导细胞凋亡3小时。 用Olympus荧光显微镜分别使用Violet，Cy5和FITC通道拍摄细胞的荧光图像。 A：非诱导的对照细胞； B：星形孢菌素诱导的细胞的三重染色。
 

图3.核绿 DCS1（Ex / Em = 503/526 nm，核橙 DCS1（Ex / Em = 514/555 nm）和核红 DCS1（Ex / Em = 622/645。虚线是小牛胸腺DNA与碘化丙啶结合的发射光谱（Ex / Em = 535/617 nm）。