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大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒使用说明书

2021.3.02
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

产品名称:大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒
英文名称:Rat Skin PrimaCell: Normal Melanocytes Epithelial Cells

大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒费用利用本公司试剂盒中提供的表皮组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的表皮组织能使得表皮组织中黑色素上皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将黑色素上皮细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠表皮黑色素上皮细胞。本体系提供了佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以大程度地降低所培养的黑色素上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠表皮黑色素上皮细胞。本试剂盒包含:

(1)OptiTDSTM大鼠表皮黑色素上皮细胞组织解离液(3×1ml) (2)大鼠表皮黑色素上皮细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠表皮黑色素上皮成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)大鼠表皮黑色素上皮组织洗液(5 x 100 ml) (5)大鼠表皮黑色素上皮细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)大鼠表皮黑色素上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)大鼠表皮黑色素上皮组织预备液(1 x 100 ml) (8)大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒使用说明书

技术传授:
冻存培养基
大鼠表皮黑色素上皮细胞培养试剂盒费用冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低  1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

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