单个细胞培养又称克隆化。细胞克隆化一般至少进行3～5次。克隆化有以下几种方法：
(一)荧光激活细胞分选仪 先进、高效、高纯度、昂贵。
(二)有限稀释法 操作简单，出现率高，为实验室最常用的方法。
(三)显微操作法 直观可靠，但操作时间过长，容易增加污染机会。
(四)软琼脂平板法 本法缺点是琼脂融化温度较难掌握，过高会导致细胞死亡，过低使细胞分布不均匀，操作较复杂，克隆出现率不稳定。
杂交瘤细胞应及时冻存，以保证细胞不会因污染或过多传代变异丢失染色体而丧失功能。目前均采用液氮保存细胞。(注意逐步降温、快速复温)
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