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胎牛血清中的外泌体参与细胞的增殖

2021.5.28
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空空

好好工作,天天开心

胎牛血清是常用的细胞培养基添加成分,它富含多种营养,满足细胞粘附、生长、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌体,并可能对所培养细胞具有一定作用。

2020年,有文献报道了胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起促进作用,则确证了血清中的外泌体确实在细胞培养中发挥一定的作用。(文献1)

该实验的研究设计如下:

一、外泌体的提取和确证

取15 mL胎牛血清,通过超速离心100000xg获得外泌体,0.22μm过滤清洗后,将外泌体溶于100μlPBS中。并进行透射电子显微镜观察,以及后期WB检测标志蛋白确证。

二、细胞培养

小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1细胞,前期用含10%胎牛血清的α-MEM培养液培养,传代。选取状态良好的第3代细胞用于后续实验。

三、细胞分组培养

对照组:胎牛血清(不含外泌体)+ α-MEM

外泌体组:在以上基础上另加入10 mg/L胎牛血清外泌体。

四、细胞检测

用CCK-8检测细胞增殖,WB检测细胞骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白。

结果显示,24h后,外泌体组细胞增殖明显高于对照组。同时,促进成骨的蛋白因子,如骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白的表达水平明显增高。

作者指出:胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起到促进作用,可为临床治疗骨破坏提供新思路。同时,国外的研究表明,使用祛除外泌体的胎牛血清培养细胞,大多数细胞的生长速率均降低,提示血清中的外泌体在细胞生长及存活方面起到一定的作用


丁香通
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